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丁香客

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  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 毕赤酵母发酵 1049天前
    1、后期我有通出样来提高溶氧,甲醇的流速也是基本不变,但是DO得变化幅度还是很大。2、我们老板也是说对甲醇转一下较高,他说可能是后期酵母菌自身代谢了诱导物
  • Biodc
    Biodc  发布了新帖 毕赤酵母发酵 1070天前

    1、毕赤酵母发酵后期,甲醇诱导阶段,文献中说溶氧可以保持稳定,但是我的做了几批,溶氧变化幅度都很大,如果甲醇富集一点,溶氧就会保持在个位数。(5L 发酵罐,转速 700罐压0.04流量4l/min 通微量纯氧)。请各位大侠,说说后期如何控制溶氧。2、对于mut+型的酵母菌,在菌浓较高时且没有进行甲醇诱导(od600=200  湿重300g/l)会不会微量的目的蛋白产生。我对比了前期甘油补加阶段发现没有条带,但是在菌浓高是,能看到微微的条带

  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 毕赤酵母中试发酵工艺 1154天前
    你好,这篇文章我下载不了,你可否给我。我的邮箱zhdchhhu@163.com   谢谢
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 组氨酸标签 1190天前
    恩,好的,谢谢你的建议。接下来的这段时间我就试试。
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 有关大肠杆菌的培养基 1190天前
    以下为一些应用的培养基配方机所获得的细胞物质量。请问这个有吗?谢谢
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 组氨酸标签 1190天前
    好的,谢谢。    1、现象用的是tris-hcl 50mM(ph8.0),目的蛋白等电点在10左右。    2、过柱子前后的电泳条带基本一样,是不是说明柱子没有吸附目的蛋白。    3、如何是组氨酸标签充分展示出来,我们有1:1的尿素处理,还是不行。
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 组氨酸标签 1190天前
    非常感谢您的回复,我们做的tev酶,百度说是在4-30度吧。那这样的话可以排除温度(收集时用1l的离心瓶3000-4000r/m 半小时)。您有没有什么建议的binding buffer,还有如何验证柱子上有没有结合,吸附过的镍柱颗粒可以拿来做SDS-page电泳吗
  • Biodc
    Biodc  发布了新帖 组氨酸标签 1190天前

    大家好,最近用大肠杆菌发酵生产带有组氨酸标签的蛋白,一直纯化不出来,但是sds-page电泳在有目的蛋白的条带。现在有几个问题想问问各位大侠!1、请问这种发酵叫培养基中需另外再中组氨酸吗?2、收集湿菌体、破壁时用高压均质机,温度对蛋白有没有什么影响。都没有在4度进行。3、过镍柱前后的电泳条带完全相同,不知道是完全没有挂住,还是说没有洗脱下来。洗脱液用咪唑最高时100mM.

  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 带组氨酸标签的大肠可溶表达蛋白的纯化 1190天前
    您好,我最近也在做带有组氨酸标签的蛋白,请问平培养基需另外再中组氨酸吗?我们没有加,诱导表达后,sds-page电泳在有目的蛋白的条带,过镍柱前后的电泳条带相同,洗脱液中没有目的蛋白条带。
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 发酵数据 1191天前
    目前还出去研发阶段,不是工业生产。还不想这么费钱。况且是做大肠,周期也很短。
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 发酵数据 1191天前
    好吧,我们也是测葡萄糖。用菲林试剂法,觉得有点麻烦。而且不好确定滴定终点。主要含量比较低,所以需要很多标准葡萄糖才能有颜色变化。
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 发酵数据 1191天前
    可不可以说说是如何滴定的,谢谢
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 枯草杆菌168系统的发酵优化 1191天前
    兴致勃勃的打开帖子一看,没有什么内容,我也是新手,没有相关意见
  • Biodc
    Biodc  回复了帖子 枯草芽孢杆菌高效分泌表达小文一篇与大家共享 1195天前
    我是初次接触枯草芽孢杆菌发酵,正在学习中。请问该片文章有培养基配方吗,我这边打不开啊!谢谢
  • Biodc
    Biodc  发布了新帖 发酵数据 1196天前

     各位大侠,请问发酵过程中的残糖大家是如何测定的?除了使用全自动酶标仪。谢谢

  • Biodc

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