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  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 胶体金在喷金量的选择 54天前
    问题一是:金标没有推荐,我现在只能先挑这几种玻纤,先测试着,可是发现金垫释放不完全,而且层析时间长,金爬速慢,应该如何选择这些辅料呢?那种玻纤型号适合当金垫,哪些聚酯适合做样品垫? 问题二:现在做PA项目,发现T线反应比C线,低太多了,是做PA项目,分别是阴性对照,标准品0.1ug,1ug,10ug用2%BSA稀释的,还有血清100倍PBS稀释,不知道是什么原因导致的
  • 高希贤
    高希贤  发布了新帖 胶体金在喷金量的选择 58天前

    各位大神,在胶体金标记成功之后,有如下几个问题 1.喷金仪器上,喷金量选择多少合适? 2.在辅料的选择上,现在金垫用的是上海金标的玻纤08,样品垫用的RB65,发现层析时间长,现在想问一下,垫子的选择原则是什么?

  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 59天前
    用的是国产的。 1.经过我做了这段时间的胶体金标记,多抗项目标记已经成功了,还是本身缓冲液PH的问题,我已经改进了。 2.现在胶体金平台上,我们对于crp项目,已经解决了假阳性,是上面大神说的对,我们标准品稀释液的问题,现在已经改善了很多,金垫走的不完全的问题,我们已经在金垫处理液上进行表面活性剂浓度的增加,改善了金颗粒的释放问题,基本上背景与金垫的释放都没有问题了,总结一句话,金标记的过程,nacl饱和试验确实不行,还是需要先试小样,再扩大生产,金标垫缓冲液体系需要加大表面活性剂的用量,喷量方面降低到8ul/cm后,就有所改善了。
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 121天前
    各位大神,这是我标记兔多抗,用的2%PEG2000封闭的,把PH值降低后,抗体加入量减少了,虽然没有死金,但对于标准品没有梯度,或者没有反应,请指教。谢谢
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 128天前
    我今天做了电泳,把多抗用电泳方法做了一下,发现多抗没有清链,现在标记效果不好,总是沉淀,会是抗体降解了吗?
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 128天前
    我们这儿就是生产原料的,所以领导不重视,现在想让我把兔抗鼠标记上胶体金,我最近做了很多变化,但是标记结果都不好,现在很发愁不知道下一步怎么办。你们标记多抗项目上有什么建议吗?或者跟单抗项目有什么区别?
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 129天前
    谢谢你的答复,多抗的纯化是用的ProA纯化,纯度我没有跑过电泳,亚型我们没有相关试剂盒,所以也不知道,现在我对多抗的标记还是一筹莫展,不知道应该改变什么才能标记上。是不是在标记多抗的时候需要增加一些步骤呢?
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 129天前
    单抗现在用nacl 饱和试验做了,工艺还算稳定,就是最近我开始标记多抗类,兔多抗,发现用10%BSA封闭之后就会出现死金,直接沉淀了,我今天分别用PEG,OVA,酪蛋白,封闭混合液,效果还是不好,我想问的是。(1)单克隆抗体与多克隆抗体在标记过程中,到底哪儿有不同?(2)多抗的PH和抗体加入量也是用nacl饱和试验筛选吗?(3)多克隆抗体非特异性会不会比较强,在后期检测中,出现假阳性,怎么避免这个问题?谢谢
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 131天前
    我最近也在看胶体金方面书籍,但是就是在实际试验中应用,总是摸不着头,尤其是我最近在标记多抗系列,总是死金,在多抗标记35mm金颗粒方面,你有什么建议吗?还有就是我跑的条子金堆积情况很严重,应该怎么处理?
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 在POCT平台上,一般添加成分都起到什么作用? 139天前
    PVA,我想用在胶体金样品垫处理中,可以吗?如果可以,我用哪个厂家的PVA,还有多大浓度可以?
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 139天前
    确实是这样的,因我入门时间很短,在胶体金平台是一个新手,没人指点的情况下,现在对于出现的问题,我也不知道从何下手了,有没有相关培训或者书籍,或者能否拜师学艺呢?
  • 高希贤
    高希贤  发布了新帖 在POCT平台上,一般添加成分都起到什么作用? 152天前

    各位大神,我是一个刚接手POCT的菜鸟,我有一些问题不太懂,希望能得到答案。1.我在封闭荧光微球的时候,怎么判断是封闭合格了?还有就是我标记的微球隔夜就会出现分层,超声一下,就会重悬,这样正常吗?2.我想知道一些添加剂的作用,PVA,PVP,还有就是比例多大合适?

  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 CRP胶体金 152天前
    1.那怎么才能让金垫上的金释放完全,是金垫使用量过大吗?还是我喷金的时候,金溶液需要稀释呢?2.样品玻纤处理缓冲液是0.01Mpbs+1%tween20+triton0.1%,金垫处理液是0.01Mpbs+tw201%+蔗糖5%+BSA1%,现在玻纤都是上海金标**08。3.金溶液的PH值在8左右4.随机血清就是我随便拿了一直没有定值,没有定性的随机血样。5.现在就是问题很多,空白样本稀释液是0.01MPBS+5%牛血清走的,就是阳性,走标准品就是没有梯度,而且不是按稀释梯度走的。谢谢
  • 高希贤
    高希贤  发布了新帖 CRP胶体金 160天前

    25nm 金颗粒,0.1Mka2co3调整的PH,10ug/ml抗体加入量,1%BSA封闭,玻纤是PBS体系,金垫也是PBS,现在出现标准品上样有问题,样本稀释液用5%小牛血+PBS上空白还是假阳,请问以下问题:A 标准品是因为测值太窄了,导致HOOK了?怎么拉开梯度?、B 空白我用BSA体系就是阴性,小牛血清为什么空白就是假阳?C 人血清中应该含量不高,但是我随机血清就基本上都是阳性,是什么原因?

  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 时间分辨荧光免疫试纸条出现假阳性!急 177天前
    有可能是微球标记过程,也有可能是垫子的问题,你把样品垫缓冲体系更改一下或者换成聚酯系列的
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 做荧光定量分析,主要是SA,C反应蛋白的炎症系列 279天前
    可是领导层面不想花钱买技术呀,还想把层析条子做好,而且这个平台没人带我,现在手里有喷金的仪器,滑膜的仪器,分割条子的仪器,荧光定量免疫的仪器也买了,就是不知道从哪儿开始做起。
  • 高希贤
    高希贤  回复了帖子 做荧光定量分析,主要是SA,C反应蛋白的炎症系列 284天前
    是企业,我们想建立这个平台,检测自己家的抗体效价。现在的问题是:荧光分析仪,我们选的是微测的荧光定量分析仪,365/610nm,但是,微球如何选择,还有就是现在我们只有酶免的方法来确定抗体好坏,想做层析,不知道从何做起。
  • 高希贤
  • 高希贤
    高希贤  发布了新帖 哪位大神有雅培化学发光的说明书呀?? 303天前

    是这样,我们是一家抗体生产厂家,现在想做化学发光试剂盒,想参考一些大厂家的说明书,做样本线性回收,以及交叉污染,还有就是雅培说明书上的一些参数,现在不知道怎么操作,还有就是说明书需要哪些参数,有大神做过吗?

  • 高希贤

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