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【求助】上有核酸,下有氨基酸序列的图片如何做

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【求购】GE预装脱盐柱 Disposable PD-10 desalting columns

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【互换】大肠杆菌M15

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  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 PEG8000浓缩病毒,没有得到沉淀 91天前
    超速离心要5万g以上,离心2小时,
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 PEG8000浓缩病毒,没有得到沉淀 265天前
    1 试剂:PEG8000有推荐用sigma的,但我用的国产生工的也没问题,2 关于5×PEG配方:有几个版本,分别是(1)40%PEG+8%NaCl,(2)20%PEG+2.5M NaCl,(3)NaCl 8.766 g+ PEG8000 50g溶于200ml Milli-Q纯水,我都试过,虽然出来的沉淀量不同,但纯化出来的病毒感觉区别不大,滴度活性都差不多3 沉淀:病毒上清加了peg后,protocal上说每20~30min混合一次,共进行3-5次然后4度静置过夜后,其实直接4度静置过夜也没事,4离心:peg沉淀过夜后4000 g,离心 20min,前面第二点说的配方(1)沉淀最多,可能跟peg浓度有关,配方(2)和(3)沉淀很少,有可能看不到,如果看不到,可以100
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 设计好的shRNA碱基序列 blast出来的结果如图可以用吗? 416天前
    楼主后来想明白了没有,其实是一样的基因,只是在基因组里面没有名字而已,没有问题的
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 上有核酸,下有氨基酸序列的图片如何做 454天前
    很久没做了,记得当时是用DNAMAN导出了这种格式的文本,再复制到word,然后截图就行了,
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  的帖子被加了1分 789天前

    回复:PCR片段回收后可以用原引物继续扩增吗?

    首先不知道你的目的是什么,如果第一轮PCR产物条带较弱的话,可以用第一次PCR产物当模板用原引物再扩一次,但不推荐这样做,因为这样会提高产物的突变机率,楼主可以先试试调整扩增条件,主要是退火温度,延伸时间和循环数,实在不行的话,最后再考虑PCR产物当模板吧。
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 PCR片段回收后可以用原引物继续扩增吗? 791天前
    首先不知道你的目的是什么,如果第一轮PCR产物条带较弱的话,可以用第一次PCR产物当模板用原引物再扩一次,但不推荐这样做,因为这样会提高产物的突变机率,楼主可以先试试调整扩增条件,主要是退火温度,延伸时间和循环数,实在不行的话,最后再考虑PCR产物当模板吧。
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 siRNA和shRNA区别 791天前
    楼主想多了,其实shRNA就是根据siRNA来设计的。比如说你先设计了几对siRNA,经过转染后检测目的基因表达情况,可以筛选一条沉默效果最好的siRNA,但siRNA是化学合成的只能瞬转,用完了还得买,如果想做长期研究的话就可以构建shRNA载体了, 用siRNA的序列加段loop来设计出shRNA,再连上质粒或病毒载体就可以了。具体还可以参考以前园子里面的帖子:【原创】miRNA,siRNA,dsRNA与shRNA的区别 【求助】shRNA和siRNA的区别【求助】shRNA和siRNA有啥区别? 【求助】shRNA与 siRNA的区别 【求助】请教关于shRNA和siRNA选择
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 QPCR做出来溶解曲线双峰,是什么原因 791天前
    有 双峰说明有非特异性扩增,应该还是引物的问题,可以多更换几对引物试试,另外,试剂也会有影响,我曾经用的引物,有的试剂就没有双峰,换了另一种试剂就没有双峰了,
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  加入了调查派 1039天前
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  发布了新帖 siRNA核酸药物筛选 1210天前

    老板最近给了课题方向,是针对某靶点做siRNA药物筛选,目前该靶点已有文献报道的siRNA药物进入临床,但本人对siRNA及RNAi并不熟悉,没有什么好的想法,所以想请教下各位的看法,该如何设计好的siRNA筛选方案?感觉要发文章的话有难度,毕竟该靶点已有报道的siRNA药物,如

  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  发布了新帖 siRNA核酸药物筛选 1210天前

    老板最近给了课题方向,是针对某靶点做siRNA药物筛选,目前该靶点已有文献报道的siRNA药物进入临床,但本人对siRNA及RNAi并不熟悉,没有什么好的想法,所以想请教下各位的看法,该如何设计课题好的siRNA筛选方案?感觉要发文章的话有难度,毕竟该靶点已有报道的siRNA药物

  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  : GE预装脱盐柱 Disposable PD-10 desalting columns http://dxy.me/RfAvYj 最近纯化蛋白需要用脱盐柱,但买不到单个的脱盐柱,要买的话就得一盒30个差不多两千多块,所以要问下谁有买过的,可以单独卖给几个吗,我的型号是GE预装脱盐柱...
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  : 上有核酸,下有氨基酸序列的图片如何做 http://dxy.me/aIvU3y 如题,怎么能做出上面是核酸序列,下面是氨基酸序列的图片。我用DNAMAN可以得到这种格式的序列,但仅仅是序列,而且用DNAMAN也只能导出为序列文件或文本文件,怎么样才能将这种格式的序列转化为图片呢?...
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 交换:Rosetta和M15菌株 2607天前
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  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 求助Rosetta菌株和M15菌株 2607天前
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  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 E.coli M15问题 2607天前
    楼主那边有M15吗,可以借给我或交换吗?
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 关于M15[pREP4] 2607天前
    楼主借到M15了吗,可以借给我或交换吗?
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 我的M15菌株是否有问题? 2607天前
    楼主的M15可以借给我或交换吗?
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 [求购]M15 有prep4 2607天前
    楼主借到M15了吗,借到的话可以再借给我或交换吗
  • 飞翔的诗人
    飞翔的诗人  回复了帖子 急求购M15菌? 2607天前
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