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  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 引物设计选择标准 4天前

    请问大家用primer5.0软件设计引物时,系统给的排名好像更注重Tm值,GC含量等是否接近及合理。好像把发夹结构,二聚体的形成等放在了次要。但是这些二聚体等又会明确影响PCR,那么请问我应该优先注重哪一个呢? 比如下图 正向引物无法避免存在二聚体及交叉二聚体形成,我仍然可以将其用在pcr中吗?如果要设计消除二聚体那么Tm值势必有较大变化。我应该优先考虑哪个?

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 跑wb内参GAPDH有两个条带 63天前

    跑wb内参GAPDH有两个条带,一抗新配的,样本新提的,不知道为什么,有大佬可以解释一下吗?

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  回复了帖子 wb内参条带清晰可见,目的条带runx2没有条带 75天前
    已重复两次,仍然没有runx2条带。强烈怀疑样品问题,但是想不出可能原因是什么。很困惑
  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 wb内参条带清晰可见,目的条带runx2没有条带 76天前

    P3大鼠SD干细胞,成骨诱导七天,ripa提蛋白,跑wb发现内参条带清晰可见,runx2没有条带。确认runx2一抗二抗没问题,因为师兄能跑出来。怀疑样品本身问题,但runx2为成骨标志基因,不应该是表达量低的问题。不知道各位大佬有啥见解。

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  回复了帖子 培养基变黄? 102天前
    这个是正常的,后面颜色会变红回来。不太清楚原因是什么,可能是培养基放太久由于缓冲溶液什么的自发酸化了?
  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  回复了帖子 大鼠骨髓间充质干细胞传代或复苏后形状变的更为铺展? 102天前
    可能是复苏条件不好,我是手捂热的,用了五分钟都有了。后面就算长起来细胞的状态也比较差。关于细胞形状变化目前还不知道原因,但是很多师兄都说随着代数的增加细胞形态确实会更为铺展,我猜测可能是特化了把
  • null
     关注了 
  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 大鼠骨髓间充质干细胞传代或复苏后形状变的更为铺展? 109天前

    提的SD大鼠间充质干细胞,先前冻存了一管,复苏后发现增值很慢,前3-4天全漂着,不知道为什么?有可以解答一下的嘛?(有的说可能是在休眠期?)现在第十天了,细胞也都贴壁长起来了,但是发现形态都是铺展开的,不像原代细胞是狭长的梭形。不知道这样子正不正常以及会有什么影响,还是说已经表现出了成骨分化的形态倾向?总结一下就是两个问题:1.SD干细胞复苏后有3-4天不贴壁(极少数贴壁在高倍下可见),后面慢慢长起来,原因为何?2.长起来的细胞形态变得铺展开来,单个细胞面积很大,不是典型的梭形,原因是什么,有什么影响?

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 培养基变黄? 109天前

    用的HyClone的alpha MEM培养基,今天加入双抗和血清配好后,加在培养皿里一看(如图),颜色是偏黄的,不是酚红的红色。也没太注意配之前是否已经变黄了,问了师兄,师兄说正常的,是会出现这种情况的。还请有知道原因的同志能帮忙解答一下。谢谢!

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 deletion到底是翻译成删除还是缺失?ablation怎么翻? 359天前

    We therefore investigated whether and how PHD oxygen sensors control bone mass by generating mice with osteocytespecific genetic ablation of PHD2, the most abundantly expressed isoform. We discovered that osteocytic deletion of PHD2 controls bone formation and resorption。例如这段英语,deletion到底翻译成缺失比较好还是删除比较好,ablation翻译成切除吗?

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 成骨分化相关基因表达高,成骨分化潜能是弱是强? 363天前

    您没有权限阅读该帖子

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 成骨相关基因表达高,成骨分化潜能是弱是强? 363天前

    细胞是从两种小鼠颅骨中分离出来的成骨细胞。文章说Pgc1a-/- mice showed significantly reduced osteogenic differentiation potential compared to those from Pgc1a+/+ mice。不知道怎么理解?成骨分化相关基因表达高,分化潜能弱?Pgc1a是能够促进成骨分化的。为什么敲除了反而相关基因表达升高?

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  回复了帖子 用荧光素酶检验转录活性的这个图怎么看 372天前
    so we designed GAL4 DBD-OSX fusion protein to prove that the transcriptional activity of OSX is DNA binding-independent ?And Sirt7 only influenced the transactivation domain(AD) of OSX? Thank you!
  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  发布了新帖 用荧光素酶检验转录活性的这个图怎么看 375天前

    请问大家用荧光素酶检验转录活性的这两幅图怎么看。图片中只给了第一幅图的说明,想请问大家第一幅图中的示意图怎么理解,上面的OSX和GAL4DBD表示蛋白质还是基因呢?E1b表示什么?上面那个箭头是表示转录方向吗?第二幅图中OSE2是RUNX2的结合启动子序列,怎么RUNX2是不是按理就是转录因子而不是基因?以及min在这里是什么意思,是遗传学图距吗?最后一个问题是,第一幅图里面为什么不像第二幅图一样,找一段启动子序列直接结合OSX,反而用GAL4来介导?? 烦请大家解答其中任何一个问题,万分感谢。

  • 陌竹轩中客
    陌竹轩中客  : 有认证,有身份。我是医生,我通过了医师认证,拥有了专属身份标识和查看病例帖的特权,还得到了30丁当的奖励。你是医务工作者吗?一起来认证吧,首次通过医师认证还能免费获得价值99元的用药助手激活码http://dxy.me/MNZna2

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