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  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 高效六通阀的清洗 41天前
    看题目所说应该为手动进样器进样,进样器此时润洗可采用配置样品溶液润洗,若要清洗六通阀,分为两种情况,一不进样状态既进样阀为load状态选择流动相清洗,二若选择进样状态仪器自动利用流动相清洗,不运行仪器状态下用配制样品溶液清洗,由进样阀排废流出。 自动进样没有那么多讲究,一般自动清洗进样器,既洗针溶液两者皆可,在连续进样多种样品状态中,不同样品溶解溶剂可能不同,流动相不同,因此洗针溶液不做要求,在进不同流动相或配置时都会选择重新平衡基线,消除误差。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 分析数据很头疼?我为你总结了172个非常精彩的句式! 50天前
    这都没人围观?必须给赞,作者辛苦了!
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 如何解决主峰拖尾和不平滑,求指教 50天前
    乙腈水1:1时出峰,大多为中等偏弱极性化合物,主峰浓度大时这种拖尾属于正常现象,MS分析尾部和顶峰,棒状图得到离子碎片一致即为无其他明显杂志,依靠色谱判断杂质不可靠,一些明显的肩峰,分叉时,色谱中出双峰才能判断为多种物质,因此这里属于正常现象,不建议进一步优化,单种物质提高乙腈含量可解决,有其他物质存在时,只能使用离子对试剂,对柱子损伤为不可逆。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 截止波长与HPLC基线下飘有什么关系? 50天前
    2.5mv的域宽峰这点波动在梯度洗脱属于正常范围,图上看你的峰太小以至于很容易达不到信噪比的基本要求,换而言之难以分析为峰,另外从图上分析流动相中含有气泡。解决方案:注意排气,减少干扰,进样量增大,浓度提高。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 刚换下来新柱子,但是高效液相色谱峰峰形还是不好 54天前
    结合前面你给出的信息,基本上可以判断这里应该是两种物质,峰型上没有问题的,还是挺不错的,至于前面分不开,问题就比较多了,前面样品中杂质较多、条件选择不好、ph的改变,色谱柱的型号以及含碳量是A型ap型AC型等等都是有影响的,这里你打开pda检测器,分别读取这两个峰的光谱信息就一目了然了.
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 刚换下来新柱子,但是高效液相色谱峰峰形还是不好 54天前
    是这样,你这个验证一下柱效,那标品看一下是否会出现类似情况,有这样情况立即联系厂家更换色谱柱,色谱柱存在质量问题,大概问题应该是封端没有处理好柱头坍塌导致。前提是跑标品你的预柱也是新的,旧的也会有影响,再者就是你的样品并不是一种物质,故此会有2个峰,很少会出现二次进样,除非是你的样品为弱极性化合物,长时间污染色谱柱,鉴于你是新的色谱柱,应该不出现类似情况。手动进样后六通阀位置是通过定量环再到色谱柱,因此定量环中的样品会被冲洗干净,一般不存在问题的。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 刚换下来新柱子,但是高效液相色谱峰峰形还是不好 57天前
    三个方面问题吧,一个是色谱柱在更换过程中有没有对新色谱柱进行预处理和活化,新买的色谱柱需要预处理后使用会更好,同时也可以避免色谱柱中的缓冲液污染流通池,以免造成不可逆后果。 第二个方面,新柱子有没有同时更换预柱,一般来说预柱易受到污染,长期不更换,即使是新柱跑色谱也会出现柱效下降、肩峰、双峰这些鬼峰问题,这里更换预柱后问题会立马得到解决。 第三,开PDA检测器观察峰形的3D光谱图,观察光谱图有没有其他变化,若有则为2种以上物质,需要进一步优化色谱条件。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 多糖除盐--求助 57天前
    文中信息有限,不能较好的判断。这里文中所说含有硫酸铵盐,作用是除蛋白质还是与多糖结合生成不溶盐类沉淀?若是后者可以用依次用乙醇、丙酮、石油醚洗涤,最后干燥。其他脱盐方法很多,想要脱得干净,方法并不是很多,这里给几个你参考一下: 方法一:文中你说的透析袋是完全可以的,首先量上900mL并不是很多,基本上裁剪2-3个12cm的透析袋就够用了,主要问题是要反复多次透析,不断达到离子平衡。实在觉得工作量大的话可以先浓缩,或者冻干,少量水溶解。 方法二:你这里的超滤不是很清楚你说的那一种,一般选择好合适的膜过滤,盐会随着溶液透过膜,多糖会被截留,取截留部分既为多糖,有条件的话可以试试Labscale Tff system,选择合适膜组件,病原菌及微生物也可过滤。 方法三:凝胶柱脱盐,多糖用CL-6B、
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  的帖子被加了1分 60天前

    回复:有紫外特征吸收图谱求大神帮助看看有可能是啥类型的物质么?

    你这个真的很难判断出是什么物质,只用HPLC确定是不是没食子酸,基本上不可能,只能给一个大概推测,具体如下:可以外标将没食子酸标品单跑一针,加上样品和没食子酸标品混合内标再跑一针,外标看出峰保留时间是由一致(差别可以0.5%-1%),若一致,再内标观察是否有其他峰出现,HPLC双...
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 有紫外特征吸收图谱求大神帮助看看有可能是啥类型的物质么? 70天前
    这张应该是没食子酸的光谱图,时间有点久了,你再拿标品验证一下
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 药物化学讨论版招募版主 76天前
    +1
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 高效液相光谱图 100天前
    从图上看,你选的光谱图是全波长扫描,这里我建议你将PDA/DAD通道波长改为190-400,主要是看到图二2个特征峰都在200-300nm处,这样UV光谱图会看的比较好看一点,第二张图上看有2个特征峰,推测一下可能是黄酮类化合物,当然也不排除共留物和同分异构体,以及混合物的重叠峰的嫌疑,鉴于你已经把洗脱时间展开很宽,那么就有两种可能,一种是在这个条件下存在混合物分不开,另一种是你这个是一个物质,但是不一定是齐墩果酸,或者带有糖苷,致使特征峰发生移位,这里给出的背景有限,不能做很详尽的分析。建议跑一次HPLC-MS通过质谱图就能准确判断是不是齐墩果酸或者其衍生物,又或纯度不够,或为其他物质等等。
  • null
     关注了 
  • 超吸水小方巾
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 求助,一个关于薄层色谱的问题 183天前
    在补充一点,基本上不会在制硅胶板过程中,添加酸或者怎么样,如果需要分离在酸或碱性中稳定的化合物,我们有氧化铝可以考虑,酸性碱性中性氧化铝都是有的,并且这样并不能改变硅胶的分离特性,若你想开发新的硅胶或者提高硅胶的分离度,只能从化学角度来尝试,通俗来讲就是改性,通过与某些化合物键合制成键合硅胶,单纯从酸碱角度其实没什么太好的效果,还不如换填料更细的硅胶实在。嗯~好像讲偏了,大概就是这样吧。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 求助,一个关于薄层色谱的问题 183天前
    这个,既然能分开,说明不需要加酸就可以用薄层板达到分离的效果,一方面建议你换高效硅胶板或者硅胶G254等尝试一下或者自己制板过程中选着填料更细的硅胶G效果一定更好,另外一方面直接在硅胶板中加酸制板不一定可取,常常我们在做TLC实验中经常会用到酸调节流动相的pH,目的是为了更好结合硅胶的非极性固定键,使分离效果更出色,常加的酸有乙酸等,其次,你也需要考虑好你的目标物质会不会在酸中降解,比如说,你要检测鞣质,你加酸的情况下,可能会使鞣质有高聚体降为低聚体,比如高聚原花青素降解为原花青素低聚体,那么在板上可能会出现多个“亮斑”,这种情况下对实验是有很大的干扰。当然对你的目标化合物没有任何干扰情况下,是可以适当在流动相中添加一些挥发性酸,这样跑板样品分离度会好一点。再者不一定书上就是最好的跑板条件,
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 液相摸条件 187天前
    大胆做,边做边学,和旁边人多交流,基本仪器会用大概一天你就学的差不多了,后期在于自己多看些书,多向别人请教。尽快把基线、管状柱、色谱图、柱体积、检测器、洗脱物、理论塔板数、柱效、洗脱顺序、填料、正向反洗脱、离子色谱、凝胶渗透、排阻、分离度、保留时间、洗脱强度、峰宽、阈值、纯度、偏差、相对响应、选择性、S/N等概念先理一遍,结合其他色谱技术及各种有机溶剂的极性强度、相似相溶性质、粘度系数等反复操练试验,三个月大概就可以入门了,会用和熟练运用是两个概念,要是只需要会用30分钟,正常人就可以操作熟练了。要是入门就要不断学习,有一些比较好的液相色谱书,可以买来回来看,不断增长自己的知识。我个人的感受就是越是学习越是发现自己认知越窄,最后最重要的建议是永远保持一颗谦卑的心。
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 液相色谱分离求助 190天前
    来了就给点意见啊
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 液相色谱分离求助 190天前
  • 超吸水小方巾
    超吸水小方巾  回复了帖子 液相色谱分离求助 190天前
    这个地方你可能有点道理,不过还是不够好,如果我是100%水冲到100%乙腈冲洗1h,由小于25%乙腈洗脱下来的强极性物质,其峰保留时间应小于15min,对于15-50min的这些物质大部分应该可以认为是中等极性。如果从图上考虑其实我这些峰大部分都是在25%左右出峰,应该是中等极性以上,并极大可能大部分是极性化合物。按照这个思路我尝试过换极性更大的溶剂,一般来说,极性大的溶剂体系更容易拉大反向柱的峰分离度和峰形更宽。但是理论毕竟是理论,实际操作中我发现换了极性大一点的甲醇,结果更差,可以看帖中的图示,有些人可能会问,你是不是没考虑乙腈洗脱能力比甲醇强的缘故,要适当放大比例,其实我是有注意这个问题的,所以在实际操作中,根据溶剂理论Snyder的一些理论,扩大了甲醇的洗脱浓度,实际结果不好,至于流

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