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丁香客

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  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 4T1培养方法 101天前
    我的细胞也这样,你们的问题解决了吗
  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 4T1细胞培养 101天前
    我养的4T1细胞表面附着着死细胞,也有很多飘浮的,细胞间隙也比较脏,而且看着细胞界限不明显,请问有什么好方法调整细胞的状态
  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 我对化合物在细胞上进行MTT测试的结果分析上有一些问题 202天前

    在不同细胞系上测试大量合成化合物的活性,也就是筛药时,我们一般做MTT实验,时间72h,然后计算IC50,但是我不会分析测试结果,希望有大神指导。有些药物会抑制细胞增殖(会观察到细胞在72h时和不加药细胞相比,数量少很多,和24h无太大差别),有些药物会使得细胞形态发生变化,比如,明显变成小圆球状且好几个细胞在一起,稀稀拉拉分布在孔板里,这是细胞凋亡吗?还是坏死?如果确定了化合物对细胞的作用方式(抑制增殖或发生凋亡或发生坏死)是不是就可以进一步对某一化合物进行细胞铺板、加药、收蛋白、跑western曝相关条带了?请大神指导下思路

  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 制作石蜡组织切片标本的体会 202天前
    同问,我做小鼠肿瘤的免疫组化也会有这种情况
  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 【讨论】关于免疫组化背景高 206天前
    想请教楼主个问题,免疫组化一抗室温孵育30min时间短吗,做了ct -26细胞的ki 67染色,没看到阳性
  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 【原创】病理学之免疫组化染色篇 206天前
    想请教楼主个问题,免疫组化一抗室温孵育30min时间短吗,做了ct -26细胞的ki 67染色,没看到阳性
  • 药学研究僧
    药学研究僧  的帖子被加了1分 258天前

    大鼠眼眶取血

    1.前期准备:2ml注射器(麻醉用)、布手套一双(麻醉用)、毛细玻璃管若干(用5~10U/ml肝素润管、高压、烤干)、方纱若干、装血用的试管(具体大小根据所需血量定)、麻药、冰盒一个2.麻醉:7.5%水合氯醛0.3ml/100g腹腔注射,最好用NS配,感觉这样麻的快,并且比较稳定...
  • 药学研究僧
    药学研究僧  的帖子被加了1分 258天前

    小鼠灌胃操作

    小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。具体操作过程如下:1. 准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨...
  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 小鼠灌胃操作 259天前

    小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。具体操作过程如下:1. 准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。2. 抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。3. 抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1 ml的注射器配

  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 大鼠眼眶取血 259天前

    1.前期准备:2ml注射器(麻醉用)、布手套一双(麻醉用)、毛细玻璃管若干(用5~10U/ml肝素润管、高压、烤干)、方纱若干、装血用的试管(具体大小根据所需血量定)、麻药、冰盒一个2.麻醉:7.5%水合氯醛0.3ml/100g腹腔注射,最好用NS配,感觉这样麻的快,并且比较稳定,具体为什么没深究过。这个麻醉深度既可以保证操作顺利进行,也不会导致血压降低,放血困难;3.操作:此时不用带毛手套了,捏好背部皮肤和前腿,把大鼠按在鼠笼盖子的边缘上,用毛细玻璃管从内眦处,指向喉咙,沿着眼球表面滑到球后静脉处(注意不是暴力插,阻力大的话可能是插到角巩膜缘了,继续暴力插会致盲),忘同一方向旋转毛玻璃,2~3圈后会有血喷出来,此时助手提起大鼠后退,就可以接血了。血接够后放下大鼠,快速拔出毛细玻璃管,此时取

  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 求关注,升二级 272天前
    关注你了,求关注
  • 药学研究僧
    药学研究僧  回复了帖子 #三年研究生生活# 279天前
    看了以后很受启发,从入学到现在在实验室做实验才一个月吧,看着比自己优秀的人心里确实有些着急,有时候觉得自己比较笨,做事没想法,想好好规划这三年。
  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 动物实验:动物抓取及给药 279天前

    在做动物试验时,为确保给药,实验顺利进行,并防止被动物咬伤,要学会用正确方法捉拿各种动物.小白鼠的捉拿:用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其他粗糙面上.向后上方轻拉,此时,小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠筋背部皮肤,并以小指和手掌尺侧夹持小鼠尾根部,将其固定于手中.大白鼠的捉拿:用右手抓住大白鼠的尾部,将大白鼠放在粗糙面上,左手戴防护手套,拇指和食指抓住两夹及后枕部皮肤,使鼠头固定,其余手指握住整个鼠体.注意握力不要过大.以免动物窒息死亡.。。。。。。第二部分:实验动物的给药在动物实验中,为了观察药物对机能功能、代谢及形态引起的变化,常需将药物注入动物体内。给药的途径和方法是多种多样的,可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。皮下注射:注射时以左手拇指和食指提起皮肤

  • 药学研究僧
  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 研究僧如何读文献 281天前

    文献就是作者解决了旧问题之后,得出的成果,会介绍实验背景,目的,方法,结果及讨论。同时也会针对已有结果,提出新问题,这也是作者将要继续做的。一、方法1、从文献作者展开看文献2、从参考文献展开看文献3、专题式看文献方法4、实验方法或实验仪器有关文献阅读法5、带着疑问去搜集和阅读参考文献6、讨论式文献阅读法7、看综述文献二、具体思路1.先找5篇跟自己论文最相关的外文文章,花一个月的时间认认真真的看,反复看,要求全部读懂,不懂的地方可以和同学和老师交流一下。一个月以后你已经上路了。2.如何读标题:不要忽视一篇论文的标题,看完标题以后想想要是让你写你怎么用一句话来表达这个标题,根据标题推测一下作者论文可能是什么内容。有时候一句比较长的标题让你写,你可能还不会表达。下次你写的时候就可以借鉴了。3.如何

  • 药学研究僧
    药学研究僧  发布了新帖 Western Blot最全攻略 281天前

    蛋白免疫印迹(western blotting)一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学检测3个部分组成,是根据抗原抗体特异性结合检测样本中某种蛋白的方法,与ELISA不同的地方在于WB是一种半定量的检测方法。下面详细介绍一下每个操作步骤:一、样本的制备(1)样本一般是组织和细胞,根据样本类型的不同,选择合适的裂解液:样本类型 裂解液全细胞 NP-40、RIPA细胞质(可溶性) Tris-HCl细胞质(细胞骨架) Tris-Triton膜结合部分 NP-40、RIPA细胞核 RIPA、核裂解液线粒体 RIPA(2)抑制剂,根据研究的目的蛋白进行选择,假如要检测磷酸化的蛋白含量,就要对磷酸酶进行抑制,现在很多公司都有多种抑制剂的混合物抑制剂 靶点 浓度抑肽酶 胰蛋白酶、血纤维蛋白溶酶 2μg/ml亮

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