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  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 24天前
    你好,我没太明白你的意思。我的理解是共培养是恶性肥胖,单培养正常分化是正常脂肪组织
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 146天前
    最好不要调成10%太容易酸了,可以试着配点醋酸,提前配好
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 162天前
    在你加a液前可能它就有卷的了,你应该看看高倍镜确定下。这个和细胞养的状态有很大关系,另外如果细胞代数高了出脂滴会慢
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 260天前
    是的
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 268天前
    a液时间2天,换干净是因为里面有让细胞收缩的因子。
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 268天前
    成熟的脂肪细胞我们没做过,但是好像成熟的不好贴壁
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  的帖子被加了1分 360天前

    做了三年脂肪细胞的一点心得

    脂肪细胞3T3-L1是我研究生时期一直在做的……毕业的时候主要做的共培养脂肪细胞-巨噬细胞。想当年自己也曾在这里求助过,所以分享一点经验和心得大家共享吧。我的脂肪细胞来源是ATCC。脂肪细胞这种有限系细胞一定要留种。初代可以1:3传代,第二代可以1:9。在传到第三代的时候,你就可...
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 做了三年脂肪细胞的一点心得 709天前
    是的,如果不是37度脂肪细胞容易锁边,卷边,冬天尤其
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  发布了新帖 做了三年脂肪细胞的一点心得 792天前

    脂肪细胞3T3-L1是我研究生时期一直在做的……毕业的时候主要做的共培养脂肪细胞-巨噬细胞。想当年自己也曾在这里求助过,所以分享一点经验和心得大家共享吧。我的脂肪细胞来源是ATCC。脂肪细胞这种有限系细胞一定要留种。初代可以1:3传代,第二代可以1:9。在传到第三代的时候,你就可以冻好几株细胞去留种了。做细胞的时候一定要注意这几点:1.培养基的酸碱和颜色,以防细胞酸碱中毒,也可以看下自己的二氧化碳培养箱所释放的CO2是否可以让细胞维持中性,然后调一下示数百分比(5%那个)让其到达中性。2.消化时洗3遍一定要将血清洗干净,否则不好消化。3消化时宁愿消化的狠一点别吹太多,剪切力比消化作用力的伤害大太多,消化的时候可以微晃着瓶子或者器皿消化,但不要消化太久,在胰酶中的细胞一定要加完全培养基离心。4

  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 关于3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞的一点心得和体会!! 1017天前
    这个是正常现象,因为FBS本身就有大量蛋白,如果分化液中DMSO忽然加到了大浓度的蛋白中必然会如此,且IBMX有让细胞收缩的作用。你可以试一下先将分化液加入培养基中,再加血清。
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 (PDF电子书)干细胞理论与技术 倾情贡献 1170天前
    帮我发一份吧~2352086233@qq.com~谢谢大神!~
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 Hela细胞解冻之后,里面有很多小黑点,调整焦距黑点又会变成空泡,不知道是污染变异还是只是脂滴而已? 1171天前
    空泡一般是老了,如果你培养液不混不黄细胞能长起来一般就没有污染。有小点点很可能是细胞分泌的蛋白
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 急!刚买的细胞,求各位帮我看下细胞状态 1171天前
    你这个细胞很脏啊!推荐用D-HANKS轻轻洗两遍再继续培养。而且你这个细胞感觉好传代了
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 3T3 的培养问题 1508天前
    5分钟好长啊……如果你要观察,稍微看一下就好,一定一定一定要缩短时间,让细胞处于无菌环境,并且不要让细胞和液体分开。 传代细胞很脆弱,没事别多动他
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 RAW为什么养不起来啊?--在线急等 1515天前
    1.你是不是用的玻璃瓶?是的话改用塑料瓶! 2.RAW喜欢微微酸的环境ph6.9-7比较适合,培养基只要放久了都会变紫红,量少的新鲜培养基也会很容易变碱 3.做实验的时候戴口罩,RAW非常容易染菌……
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  加入了调查派 1539天前
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 急!急!急!战友们帮我看看 3T3-L1前脂肪细胞分化成功了没有 1620天前
    我觉得有一点点脂滴,如果你那边看是圆的 红的,圆的边界红的微微深一点,红色的圆滴不随遍漂,就是脂滴……不过……也太少了点吧……
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 3T3-L1脂肪细胞诱导分化问题? 1620天前
    我也在做之中……看了一些帖子,条件正在摸索 1,用状态好的细胞!4-6代之间最好! 2.接触抑制时间一定要控制好,抑制时间长了很容易挂的!各种时间都一定要控制好! 3.一开始的时候动作要轻,但是不要慢!一般一开始你加A液的力度就是后面你换液用的力度,这样细胞不会飘的太厉害 4.保...
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 如何把细胞养的更漂亮(Ⅱ)!(修正版) 1717天前
    版主你好 我养的是3t3-l1前体脂肪细胞(ATCC),总死,原因主要要消化上,我检讨下我的主要问题…… 1.我用D-HANKS洗的细胞是否可以? 2.消化时,版主你所说方法在这种细胞上是否适用?脂肪细胞状态一不好就吐脏东西细胞就很难贴,我用的是0.25%的胰酶 3.我不清楚这种...
  • 茵茵小豆
    茵茵小豆  回复了帖子 请教3T3-L1(前脂肪细胞)的培养经验 1717天前
    借个楼求教啊啊QAQ: 1.消化时的状态时间把握不好,细胞要不有漂的要不有没消化下来的。(用的0.25%胰酶,无EDTA) 2.吹细胞时有些细胞吹不下来,反复吹打10次后培养基变碱吹下来的细胞受伤状态不好,没吹下来的细胞还是下不来 3.PH把握不好 总是调到大红色(里面有明显黄色...

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