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  • 苜钼kmt
    苜钼kmt  回复了帖子 大家用ins-1细胞一般做什么实验?为什么选用它呢? 2天前
    请问你们的1640是粉末还是买的成品?我们目前用的Hyclon的瓶装。还有就是请问你们对INS-1造模吗?是用高糖高脂还是STZ?可以跟我说下吗?造模一直不成功,终浓度0.5mM的软脂酸和33.3mM的葡萄糖24h细胞还好好的。
  • 苜钼kmt
    苜钼kmt  回复了帖子 多糖分析柱子问题 3天前
    感谢回复,这个图是在百度文库里看到的http://dxy.me/e3DvfG;sxts=1541152702298选择TSK,一方面是经费原因,因为我们之前买了TSK G4000PWXL,所以保护柱也是,如果换其他家的就还要在买保护柱了。另一方面,我们对于这种低聚糖的分离没有经验,所以也算学习了。不知道答主有没有推荐的用于低聚糖的分析柱?谢谢!
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    苜钼kmt  回复了帖子 高脂加STZ注射诱导2型糖尿病大鼠实验 14天前
    一周左右,先做OGTT, 后做ITT
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    苜钼kmt  回复了帖子 多糖分析柱子问题 14天前
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    苜钼kmt  回复了帖子 小肠内分泌肿瘤细胞STC-1, NCI-H716或GLUTag 69天前
    我买了STC-1
  • 苜钼kmt
    苜钼kmt  发布了新帖 多糖前置拖尾峰处理? 173天前

    最近在分离多糖,先过DEAE纤维素柱,然后就是Sephadex的不同系列。不知道为什么就是有前置拖尾峰。我们没有采用苯酚-硫酸法,而是所有洗脱液都是直接用TSK G-4000色谱柱,用ELSD检测器检测合并。特别是有一段,过完DEAE之后旋干就呈现晶体状,但是依然有前置拖尾峰,后期过了Sephadex G-75,分离到了不同时间段的峰,但每个峰依然是前置拖尾,真是累了。不知道下一步该怎么办了。请有类似经历的前辈指导下!非常感谢!分离过后

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    苜钼kmt  回复了帖子 大家用ins-1细胞一般做什么实验?为什么选用它呢? 241天前
    我一般用枪吹打15下左右。还有就是注意细胞代数,代数过高细胞老化也容易死。
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    苜钼kmt  发布了新帖 INS-1和STC-1细胞购买及培养经验交流 245天前

    之前买这两个细胞费了不少劲,所以把购买和培养的经验发出来,大家一起交流下,希望给后面的小伙伴一点帮助。INS-1细胞由国家细胞平台购入,从北京发货,他们是夏天7月中旬到9月还有冬天特别冷的时候都不发货了,这期间要细胞的只能自取。我的INS-1细胞从订购到发货期间长达2个月,期间询问过几次,那边老师说要等细胞稳定了才能发货,所以想要买这个细胞的同学一定要合理安排实验进度。收到后按照那边老师给的培养条件:1640+15%FBS培养,都是GIBCO的。长势不错,就是相对慢一点。不过还是要说这个细胞比较娇贵,1640从GIBCO换成Hyclone没什么影响,但血清一定要用好的,期间我换过一次便宜的FBS,细胞越养越少,最后没了。后期换实验室,搬进了一间有-80℃超低温冰箱的细胞房,细胞就开始飘了,每

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    苜钼kmt  回复了帖子 大家用ins-1细胞一般做什么实验?为什么选用它呢? 264天前
    聚团现象还好哎,我每次都会充分吹打至形成单个细胞,所以这种情况比较少见。建议用50ml EP管进行吹打。
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    苜钼kmt  回复了帖子 高脂加STZ注射诱导2型糖尿病大鼠实验 265天前
    出现了这些问题也没有办法只能参考文献继续做了,有一段时间没上丁香通,所以没看到大家热心的回复,这里一并感谢。最后采取的办法是,不测量空腹血糖,而是随机血糖,即禁食6小时后血糖高于16.7mmol/L的视为造模成功。同时辅助OGTT和ITT,结果表明造模成功。
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    苜钼kmt  回复了帖子 大家用ins-1细胞一般做什么实验?为什么选用它呢? 265天前
    我是从国家细胞培养平台买的,倒也不难养。之前一直按国家细胞平台给的方法养着,只要加15%的FBS就行,长得挺好的。不过最近我们换了实验室和培养箱,结果细胞就开始飘了,贴壁不牢,打算加BME、hepes和丙酮酸钠再试下。我们实验室因为地方小的原因,细胞房里放了一台-80℃冰箱,我怀疑是冰箱的震动导致的细胞贴壁不牢。不过这个因素目前我没有办法避免,只能先换培养基试下了。
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    苜钼kmt  回复了帖子 大家用ins-1细胞一般做什么实验?为什么选用它呢? 265天前
    你的问题我没有遇到过哦,在96孔板长得也很好呢。不过最近我们换了实验室和培养箱,细胞贴壁就不好了,很多飘着的,也不知道为什么。之前一直用国家细胞平台的培养方法养着,现在考虑加BME和hepes还有丙酮酸钠了。希望能变好点。
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    苜钼kmt  回复了帖子 请教。。。如何给SD大鼠注射胰岛素? 573天前
    后来解决了吗?我也在困惑这个问题。。。
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    苜钼kmt  回复了帖子 糖尿病模型的讨论 573天前
    药理小白请问,回抽到什么才是进了腹腔?空气?
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    苜钼kmt  回复了帖子 糖尿病模型的讨论 573天前
    如果自发血糖恢复了,怎么办呢?再注射STZ吗?
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    苜钼kmt  发布了新帖 高脂加STZ注射诱导2型糖尿病大鼠实验 577天前

    最近在做2型糖尿病大鼠实验,买的4周龄的SD大鼠。 因为第一次做加上这是实验室第一次做药理实验,老师也不会,所以很多准备工作没有做好 ,这是下次要多注意的地方。查文献,打算高脂饲养4周后开始打STZ,但是万万没有想到,加上适应性喂养的一周,到第三周的时候,大部分大鼠体重就超过240克了,由于是自由摄食,就不知道人家说的,在8周龄,240克左右是怎么办到的(后来也考虑到,可能是笼子挤了点,活动量不够?我们用的大小鼠通用笼,每笼饲养2只)。等到4周的时候,体重已经到500克左右了。这时候开始预实验,文献参考是30-45mg/kg,我们选用了30和40两个剂量,每组3只。结果打40的陆陆续续死了两只,就是不吃不喝的那种,一周后测血糖,30和40各成了一只,30的有两只没成,于是一周后没成的补注射3

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    苜钼kmt  : 我对丁香通上的产品:"Rat/Mouse Insulin ELISA 大鼠/小鼠胰岛素Elisa试剂盒"很感兴趣,近期有购买意向,欢迎知情者和我联系。 http://dxy.me/niQbAb
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    苜钼kmt  回复了帖子 药物MTT实验步骤(贴壁细胞) 635天前
    请问,调零孔没有细胞,加的无血清培养基和MTT不应是吸除后然后加DMSO吗?那为什么不直接加DMSO调零呢?

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