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  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 183天前
    不会,正常的
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 183天前
    正常的细胞
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 MRC-5的养殖 求教 188天前
    我以前发过一份帖子,认为可以优化一下培养方法。后来实验多了,发现优化方法用处不大。这株细胞的极限是分裂42~46代。如果我没记错的话,朋友从ATCC买来这株细胞已经超过20代了,国内引进后,传代冻存后分裂代数约是30代。你买来传代几次后分裂代数已经接近极限,这时候冻存的细胞剩余分裂代数是很低的。另一方面传代培养可能损伤细胞,进一步缩短分裂代数。建议:引进一瓶T25,培养后传代为1瓶T75,传代为4瓶T75,再传代为16瓶T75,将细胞冻存为1.0×10^6个/支,可以冻约80支。冻存时的代数是n+4代,此时细胞的分裂代数约是38代左右。复苏后剩余4~8代分裂代数,可供传代2次。复苏在T25中,长好后直接用于实验,即便传代也不要超过2次。如果你需要大量使用该细胞,可以从ATCC引进,5000多
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 细胞污染求助 189天前
    复苏新的,培养基换新的,还是出现,比较大的可能性是细胞种子污染。建议:1、配制细菌、真菌平板培养基,接种纯培养基、细胞种子、正在培养中的细胞培养液上清,培养观察。2、种子污染,可以重新买。3、种子污染,细胞很重要,很难买,可以做简易药敏。把你能拿到的各种抗生素配制琼脂平板,培养基灭菌后冷却到50℃,分装25mL一管,把你的抗生素加入5~100μg/mL(根据种类),混匀后倒9cm直径平板,刮下单菌落悬成100μL,涂布在平板上,选择不生长的抗生素种类加入培养基培养细胞。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 细胞冻存 197天前
    随便用,我就买了个广州化学试剂厂的DMSO冻细胞,不知道冻了多少了
  • 白鹄
    白鹄  的帖子被加了1分 258天前

    回复:关于流感病毒滴度

    使用MDCK测试流感滴度,快的话4天就能出结果,通过CPE判定,不需要额外的检测。如果看不到病变,说明你毒种滴度不行,或者你培养方法不对
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 关于流感病毒滴度 258天前
    使用MDCK测试流感滴度,快的话4天就能出结果,通过CPE判定,不需要额外的检测。如果看不到病变,说明你毒种滴度不行,或者你培养方法不对
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 求教:请问各位为什么养的THP-1细胞老是聚团呀? 298天前
    这个细胞正常状态是分散的,不聚团。真是哪里都有云玩家,把错误当理所当然。http://dxy.me/HWXaxI
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 细胞污染,找不到原因,心塞! 311天前
    你同学复苏的传一瓶给你不就行了,多难的事情啊。我估计是你解冻的时候冻存管进水了,内旋式(盖子伸里面)的冻存管很容易进水污染。你同学传给你,你再操作没有问题,那么100%是解冻时候的问题。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 316天前
    我也不知道,自己查吧THP­1 (ATCC ®  TIB­202 ™ )
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞正常培养条件下贴壁 332天前
    加巯基乙醇了没?我没研究过啥原因,正常的都是散开单个的,不会聚团成这样
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 335天前
    任何试剂都必须除菌,这是默认操作。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞正常培养条件下贴壁 335天前
    没救了,新买一批吧
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 340天前
    应该是没有问题的,我用的就是化学级别的。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 细胞复苏 341天前
    没救了,建议先买液氮罐,再重新买细胞
  • null
     关注了 
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 351天前
    原因我也不得而知,我只是遵循说明书配制的培养基,连续培养了3个月也就偶尔有一小点抱团,属于正常现象。现在我们实验也做完了,暂时不养这个细胞。不知道你培养基是怎么配的,有没有加β巯基乙醇。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 360天前
    培养密度不超过10^6/mL,冻存没问题啊,冻存1~10x10^6/mL。我们冻存的密度大概是3x10^6/支,复苏在一个T75里,20mL培养基。
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 375天前
    北京产的,直口瓶哪种
  • 白鹄
    白鹄  回复了帖子 THP-1细胞培养 404天前
    1、观察是否有污染,可以拿平板接点培养液进去培养看看。2、培养基会偏黄的,1640培养基本身就不是很红3、细胞计数,按照密度要求培养

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