最近一直在跑Western Blot，目的蛋白为menin，分子量约为68KD，是一种核蛋白。我提了胞核和胞浆蛋白后分别跑胶显影，结果总是有杂带，在胞浆蛋白部分跑不出正确位置的条带，但胞核部分目的条带和杂带都有，奇怪的是每次杂带显影非常清晰，并且都在同一位置，胞核和胞浆的杂带也一致。    另外，在网上看了看Abcam的抗体，在其网站上贴出来的Western Blot图片也有杂带，且和我的杂带在同一位置。请教各位大神这是怎么回事？谢谢！  图1：胞核部分蛋白的结果；  图2： 胞浆部分蛋白的结果；  图3：Abcam官网上的Western blot图片 （http://www.abcam.com/menin-antibody-epr3986-ab92443.html#description_images_1）。

最近在做WB，内参用的是GADPH,目的蛋白是menin，分子量大约68kd。电泳时间：90v 30分钟 4% 浓缩胶；120v 1h  10%分离胶，等胶跑到底后断电。转膜350mI 1小时，湿转。 5%脱脂奶粉封闭70分钟。一抗用1:1000；1:5000两个浓度梯度，4度孵育过夜；TBST洗膜3次，每次5分钟，再TBS洗膜3次，每次5分钟；荧光二抗1:10000 室温孵育1h，洗膜同前。扫膜每次内参的条带都有，并且很清晰；但目的条带一直没有出来。（说明，一抗的抗体来自rabbit，二抗用的是goat抗rabbit，分离胶的浓度7.5%和12%的也都试过）请大家帮忙分析原因，谢谢。

最近做WB, 蛋白分子量在68左右，用荧光二抗，一抗是goat多克隆抗体，二抗用的是donkey anti goat荧光二抗。结果很不理想，见不到条带，只有模糊影，请教大家，帮我分析一下可能的原因，谢谢。

大家好，我是生物信息学的新手，希望大家能提供一些好的生物信息学的交流与学习的群，或者新建一个群，大家共同学习，相互交流。谢谢！

我现在想测定蛋白浓度，用紫外分光光度计测的结果大概80多，但用BCA法测得的结果却是3点几。兄弟姐妹们测蛋白浓度用的是哪种方法？有这方面的困惑吗？谢谢！

本人现在博士一年级，想申请公派出国，做完实验后回来，求联系国外老板的技巧。请各位大侠支招，谢谢！！！

回复：【公告】2015年考博真题回忆汇总，祝您成功！(不支持站友在该帖讨论考题，专帖专用)

广西医科大学普外科习题-胃肠腺体外科