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  • 漏网之鱼_2017
    漏网之鱼_2017  回复了帖子 STR 毛细管电泳特异峰分析 737天前
    你好,有段时间没有来论坛了,刚才才看见,不好意思。不知道你的问题解决了没有?从图中看出小片段信号值高于30000,产量太高超出仪器的采集范围。实际上大片段产量还行,信号值基本在几千,软件处理时显得低。多重PCR的话,特异性挺好。所以解决方法就简单了:增加延伸时间,照顾大片段;毛细管电泳上样时,增大稀释倍数,最后信号值控制在5000左右为宜。试剂不同,酶不一样了,酶的特性自然不同。说明新换的试剂扩长片段效率比较低。
  • 漏网之鱼_2017
    漏网之鱼_2017  的帖子被加了1分 742天前

    回复:【求助】STR 毛细管电泳特异峰分析

    @锤姑娘  @天猫 看天猫前辈还没有回复,就上述问题冒昧的讨论下,以供参考。从图中可以看出,STR引物分别用三种荧光标记的,FAM(蓝色),HEX(绿色),TAM(红色)。其中橙色是Marker,对于产物大小不超过500BP的一般用LIZ500。分析...
  • 漏网之鱼_2017
    漏网之鱼_2017  回复了帖子 STR 毛细管电泳特异峰分析 807天前
    @锤姑娘  @天猫 看天猫前辈还没有回复,就上述问题冒昧的讨论下,以供参考。从图中可以看出,STR引物分别用三种荧光标记的,FAM(蓝色),HEX(绿色),TAM(红色)。其中橙色是Marker,对于产物大小不超过500BP的一般用LIZ500。分析软件应该是GeneMarker,建议将图中想讨论的产物大小手动标注出来。一图多色,可能是多重PCR,或者PCR产物混合上样。根据描述,样本应该来自二倍体生物。下面讨论提到的问题:1,首先要排除是不是混合上样,如果是就好解释了,大红粗箭头指的那个位置的峰是其他位点的结果,而且结果非常好。2,如果不是混合上样,那就要考虑到非特异产物,好在知道产物出现的大小范围。不在范围内的峰,就是杂带,这在设计引物时就已经决定。3,至于

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