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  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 IP背景高,查论坛好多人加核酸酶,这个核酸酶用的普遍吗? 100天前
    七海生物的全能核酸酶我有用过啊,效果蛮好的,能降解很多核酸,基本上可以消化干净,如果是IP你希望降低背景,应该多少会有一些帮助。不知道其他人怎么样,我现在是在纯化实验后用这个,跟你的目的不一样,我是用这个酶去除与蛋白结合的核酸,效果蛮好的。另外这酶价钱不低,我一年从他家买5000ul左右,好几万呢!
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 ni镍柱的选择 105天前
    我现在一般都是直接买七海生物装好的柱子,他们那个是重力柱,外形有点像注射器,不过那是直接重力作用的,没有推杆。这家的我已经用了快两年了吧,挺稳定的,倒是可以推荐你试试,价钱也很便宜
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  发布了新帖 蛋白黏成鼻涕状,超声后没什么用 365天前

    做co-ip,超声后样品还是粘的不行,咋回事呀

  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 核酸酶问题求助 365天前
    谢谢大神
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 核酸酶问题求助 365天前
    晕死含EDTA了呀!benzonase我都买了,这不就不能用了么
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  发布了新帖 核酸酶问题求助 407天前

    做IP呢,网上看有些人会用这个核酸酶处理一下样本,去除核酸污染,还可以降低蛋白黏性。我的样本中含有蛋白酶抑制剂啊,对这个核酸酶有影响不?

  • 江大zz木子李
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 发酵了一批蛋白如何快速彻底纯化? 470天前
    我最近也刚买了七海生物的镍预装柱,有谁知道使用后是否一定要超滤除盐吗?
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 蛋白纯化问题 519天前
    我网上搜的时候看到过他们图片,好像是白色???纯化前还要先螯合Ni?
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 IP实验Protein A/G 519天前
    非特异性结合可以试试通过更改NaCL的浓度和去垢剂的比例来进行去除非特异性的相互作用当然也有可能是你的磁珠不好使哈哈
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 his纯化实验 521天前
    啊。。。悲剧了,我死纠结着EDTA不放,居然是不能加的东西,唉!!!另外我的样本中大部分是包涵体,只有一点点是可溶的,如果我用镍柱纯化,可以纯化出这部分可溶的吗?
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 benzonase酶制剂 521天前
    是了,我现用的是国产七海生物的,不过挺稳定的,你可以试试,只不过刚开始需要好好摸摸条件,这个得稀释
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 蛋白纯化问题 526天前
    谢谢哦,那个层析柱过期了,而且颜色也几乎看不出蓝色来,现在重新买了,还没拿到,很可能是柱料坏了
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 gst 纯化载量 526天前
    太感谢了!国产的效果跟进口比差的多不多,能省钱自然更愿意省钱啦嘿嘿
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 benzonase酶制剂 528天前
    全能核酸酶Benzonase Nuclease能够降解所有形式的(双链,单链,线状,环状)DNA和RNA。将核酸完全消化成3-8个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶适用于去除蛋白质产品中的污染,符合FDA关于核酸污染去除的规程。可以与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白质产量。货号RPE002,这是之前我用过的,还不错,你可以查查看
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 co-ip实验求助 528天前
    建议可以在细胞裂解时加点benzonase核酸酶,对降低背景有一定的帮助,这样也有重复性。            
  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  发布了新帖 蛋白纯化问题 533天前

    本人纯化一个大分子量的蛋白A(87KDr),蛋白A含有his标签,但是挂Ni柱能力不佳,还极易洗脱,50mM咪唑就能洗脱,求大神如何破?

  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  发布了新帖 his纯化实验 533天前

    his蛋白纯化过程中,可以用蛋白酶抑制剂防止蛋白降解吗?大家EDTA是怎么样使用的?什么时候加入?

  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  发布了新帖 gst 纯化载量 533天前

    马上要纯化蛋白,带gst标签,往前没做过纯化不知道现在市场上的试剂盒载量怎么样?我的蛋白预计有10mg左右,摸不准要买多少盒子,求个推荐

  • 江大zz木子李
    江大zz木子李  回复了帖子 免疫沉淀实验,BSA封闭是否必要? 962天前
    pull-down一般不推荐BSA封闭哦。在实发现非特异吸附现象很严重时,才考虑加入BSA。

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