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【求助】疏水层析如何进行初始条件的优化

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【资源】2010中国药典

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【资源】protein purificatin ppt

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  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 智能和网络普及化:谈术后黄金监护期的低成本远程监护策略 2087天前
    您没有权限阅读该帖子
  • 最政治的人
    最政治的人  加入了调查派 2363天前
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 akta 填料装柱视频及解说 2422天前
    没有用装柱器呀,就是一根延展管和一个Conneter
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 抗体无菌过滤的问题 2428天前
    很可能不是由于过滤的原因产生的沉淀,而是过滤之前抗体溶液里就有沉淀,但是是可溶性的肉眼不可见的沉淀,楼主可以做一个分子筛检测一下里面的聚体的情况,如果仅是测定过滤前后OD的变化等是不能说明情况的!
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 akta 填料装柱视频及解说 2428天前
    1. 装柱子是一个经验和技术的积累,要想装出好的柱效,有多种装柱方法其中包括恒压法,恒流速法,变压法(前期控制一定压力恒定,后期控制一定压力恒定),变流速法(前期维持一定的流速,后期维持另外一个流速),还有变压变流速(前期控制流速,后期控制压力)等等,有许多; 2. 我个人喜欢凝...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 DBC测试诡异事件 2428天前
    其实不诡异,楼主能否公布一下你的实验数据,每种抗体的动态载量会随着条件的变化而变化,你们没有做过中试,只是根据中试的经验就假定的认为我这种抗体他的载量应该是多少,是不客观的,楼主如果反复验证多次,还是这个结果,说明实验本身没有错误,而且也证明了你的结论,在你现有的实验条件下,他的...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 关于AEX和CEX平衡液的电导 2428天前
    不一定非要一样,上样溶液的电导既可以低于平衡Buffer ,也可以高于平衡Buffer ,但总之有一个目的是能够通过AEX或者CEX捕获到你的蛋白;但还有注意几个问题: 1. 离子交换的平衡缓冲液一般选择是电导比较低,如果你的样品液低于你的平衡电导,能够保证你的蛋白被捕获到,但你...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 DEAE FF平衡超慢的问题 2546天前
    当然可以,当走完氢氧化钠以后,走一部分的水之后,可以直接走500mM,pH=7.0 的PB母液,或者是你需要的相应的PH的母液,大概0.5CV左右,PH就过来了,这样再走你的平衡液就成了,能大量的节省时间和你的Buffer的用量;
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 AKTA 层析系统死体积如何更改设置 2548天前
    楼上说的很好
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 多糖沉淀如何出去氯化钠 2549天前
    可以采用超滤的方法脱盐
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 】如何选择AKTA? 2550天前
    AKTA explore 就正如Explore 这个单词的意思一样,探索,所以他是专门用来做工艺研发的; 1. 首先他的流速比Basic 要高,Basic 的流速0-10ml/min 而Expoler 100流速可以到0-100ml/min; 2. Explore 有7个柱位,可...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 sephacryal s-1000纯化质粒DNA 2550天前
    所有的色谱操作都分为 平衡,上样,洗脱, 再生,清洗这样五步
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 AKTA FPLC零件连接问题 2550天前
    所有设备全部关掉,重启一下,看看; 如果能够连接上就OK, 如果还是连接不上,可能是CU-950坏了,它负责电脑和AKTA设备的连接,
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 关于DEAE FF 柱子的再生回收问题 2550天前
    对呀,还可以查看一下填料的说明书,把能用到的清洗剂全用一遍,呵呵
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 关于DEAE FF 柱子的再生回收问题 2550天前
    可以使用1M NaOH+0.5MNaCl联合清洗,洗完之后,再用30%异丙醇清洗;这些清洗最后是填料从柱子上拆下来,离线的摇床 多摇一些时间,这样清洗完成之后如果还不能去除,基本上填料可以更换了
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 】关于DEAE填料清洗和内毒素的去除 2550天前
    但使用同样的样品、填料和物料,在实验室规模未出现此现象,是因为你在实验室规模,你的上样量很少,导致填料的吸附量相对于你工业规模的吸附量来说可能比较少,实际过程实际一样的,实验室如果你发酵液充分上样的话,或者次数使用足够多,也会出现上面的现象,DEAE是阴离子交换填料,因为大肠杆菌...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 】如何选择AKTA? 2550天前
    AKTA basic 是做简单的蛋白纯化,如果平时做纯化的实验不是特别多,只是制备少量的蛋白,那用Basic比较合适,因为价格相对便宜,而如果做纯化工艺的开发包括中试,那么最好选用Explore,因为无论是流速方面还是软件方面,Explore都有Basic许多不能比拟的优越性;当...
  • 最政治的人
    最政治的人  回复了帖子 配置50%甘油 2550天前
    配置50%甘油,加普通的双蒸水以后,再去灭菌
  • 最政治的人

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