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  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 膜片钳实验外包,求推荐靠谱的公司 344天前
    已私信您,请注意查收!   
  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 实验外包或学校实验平台 345天前
    您好,我们公司可以做的,具体可以私聊,
  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 实验外包 345天前
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  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 实验外包算不算学术不端 345天前
    已私信发您咯
  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 科研实验外包 345天前
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  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 细胞凋亡实验外包 345天前
    已私信您,请注意查收哦   
  • 晴天mmm
    晴天mmm  回复了帖子 本人因样本获得耗时长但时间紧张,需要实验外包 345天前
    已私信您,请注意查收
  • 晴天mmm
  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 支原体培养技术 787天前

     支原体又称霉形体,是很小的原核细胞,完全没有细胞壁.菌体形态多变,具高度多形性,球形、梨形、分枝的或螺旋的丝状等。营养要求苛刻,在高血清量的复杂培养基上生长,在固体培养基上菌落呈油煎荷包蛋样特征性外观。    培养基:牛心汤复合培养基等。分离培养:无菌采取肺、肝、脾、肾组织,直接剪成小块放在固体培养基上划一直线,再用无菌铂耳环在与其垂直方向划线,或者将组织块剪碎磨成匀桨,经液体培养基连续系列稀释后培养.若当液体材料为牛乳、排泄物、胎液等,可直接取0.2ML接种于液体培养基或取0.1ML接种于固体培养基。固体琼脂平板置37摄氏度潮湿需氧条件或在5%二氧化碳下培养48-96h,用斜射光或放大25-40倍的立体显微镜检查,若有特异菌落出现,应选取散在的单个菌落用无菌

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 组织切片的免疫金标记 788天前

     免疫金标记技术(immunogold labelling technique)是以胶体金作为示踪物,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠和鞣酸等作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,故称胶体金。    实验原理:利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质,与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外,胶体金还可与其它多种生物大分子,如SPA、PHA、ConA等结合。    实验材料:组织样品    试剂、试剂盒:免疫金标记物    仪器、耗材:培养箱  显微

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 小鼠体内生物分布实验 789天前

    二、实验原理1. 小鼠的抓取固定方法:    小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图一),将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(图二)。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。  如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 动物组织培养准备技术之清洗与灭菌(2) 794天前

    (四)消毒与灭菌1.物理消毒法1)射线消毒主要是使用60Co、X射线进行灭菌消毒,可用于牛血清和塑料制品的灭菌。2)紫外线消毒用于空气消毒,操作台面和一些不能用干热,湿热消毒的培养器皿,如塑料培养皿,培养板等,是常用的消毒方法之一。消毒方法,现在一般用无臭氧型紫外灯。消毒的效能与消毒的距离成反比,因此应根据消毒的目的适当设置消毒距离:进行空气消毒的灯管应距地面2.50m以内;台面的消毒应在0.80m以内;培养器皿的消毒在0.30m以内。3)干热灭菌主要用于玻璃器皿的灭菌。将用于细胞培养的器皿包装后放入干燥箱内,加热到160℃,保温90 ~ 120 min。用于RNA提取实验的用品则需180℃,保持5-8h。4)湿热灭菌此方法也称为高压蒸汽灭菌,适用范围广,是最有

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 基因测序的新里程碑:你的哪些基因来自爸爸,哪些来自妈妈? 795天前

    得知分析基因突变版本到自哪位双亲,就能确定位于染色体上某一区域的一组相关联的SNP等位位点(即单倍型,haplotype),对人类基因组测序来说,这是一个新的质的飞跃。为了计算每条基因序列分别继承自爸爸还是妈妈,德国Saarland大学生物信息学中心的科学家开发了一款著名工具以至于《Nature Communications》期刊连发两篇文章连续报道。人类有46条染色体,内含生命遗传信息(即基因组)。后代的染色体总数与亲本保持一致,因此,亲本(父亲和母亲)的生殖细胞中都只有23条染色体,精子和卵子融合成受精卵,诞生新生命。半套染色体被定义为“单倍体(haploid)”。“从父亲或母亲那里继承的不同基因版本决定了孩子是否会生病,以及生病了需要怎么治疗,”Saarland大学的生物信息学教授To

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 动物组织培养准备技术之清洗与灭菌(1) 796天前

    (一)使用过的玻璃器皿的清洗1.使用过的培养用品应立即浸入清水,避免干涸难洗。2.用洗涤剂清洗玻璃器皿,自来水清洗数遍。倒置自然干燥。3.浸入酸性洗液过夜。将玻璃器皿浸泡2-4h后便可冲洗;当洗液使用时间过长,颜色由黑红色变成黑绿色甚至墨绿色时,应适当延长浸泡时间。当酸性洗液转变成绿色时,应重新配置洗液。浸泡时应使瓶内的所有玻璃表面都接触到洗液,勿留气泡或死角。没有浸泡干净的玻璃器皿,可能会影响细胞的生长状态或影响显微摄像的效果。4.培养用品从酸性洗涤液中捞出后用自来水冲洗10-15次,去除残余酸液,蒸馏水涮洗3次或浸泡过夜,倒置烘干。5.包装:用牛皮纸或一般纸将培养器皿包好。培养瓶和培养用瓶只需包裹封住瓶口即可。 (二)胶塞的处理1.新胶塞应先用清水清洗之后再用0.2%NaOH煮

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 动物体内实验 798天前

    小鼠体内生物分布实验一、实验目的  1. 学习小鼠的抓取固定方法、尾静脉注射、小鼠的处死及小鼠的间剖实验等基本技能。2. 学会动物分布实验的数据处理。   二、实验原理小鼠的品种和品系很多,是实验动物中培育品系最多的动物。在微生物和各种实验研究中,以小白鼠最为普遍,有英国种、法国种、德国种和瑞士种等,而以瑞士种最著名。目前我国各生物制品、医学研究单位繁育的小白鼠为昆明种,该品系为封闭种群,最早在抗日战争时期从缅甸而来,在云南昆明繁殖,经过多年培育繁殖而成,该品系小鼠体型较大,繁殖力强。

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 以新鲜动物组织为材料对细胞中酸性磷酸酶的定位 800天前

    实验方法与步骤:1 动物新鲜组织低温恒冷切片,片厚6μm,冷丙酮固定10min。2 把切片置于酸性磷酸酶工作液中(预热至37℃),37℃处理0.5-1h。3 蒸馏水洗3次,每次1min。4 1%冰乙酸液处理3min。5 蒸馏水浸洗2次,每次1min。6 2%硫化铵液处理3-5min。7 流水冲洗数分钟,蒸馏水洗3遍。8 用1:30的吉姆萨染液染色15min。9 封片10 镜检细胞中酸性磷酸酶的定位注意事项:1 孵育液必须现配先用。2 当铅离子浓度过低时,产生的磷酸离子不能完全被结合而发生弥散,并可进入细胞核,会造成染色假阳性。3 孵育时间过长也可能发生酶扩散和细胞核染色现象

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 细胞培养注意事项 801天前

    a.实验进行前,先摆好操作台,开启操作台及无菌室紫外灯灭菌30-60min;b.灭菌后关闭无菌室、操作台紫外,并开启日光灯15-20min后打开操作台和无菌室加装滤网的通风系统5-10min以降低臭氧浓度(减少对操作人员的伤害),开始实验。c. 实验人员必须穿好实验服,戴好口罩及手套后方可进入实验室。这一方面可以减少无菌室的污染,一方面可以保护实验员的安全。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台,并且操作期间切不可弄伤手部及接触感染源的皮肤。d.实验操作前用75%酒精擦拭工作区域,并应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作,在酒精灯附近操作。e.实验时避免经过培养皿或试剂瓶上空,小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口。g

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 蛋白质检测 801天前

    蛋白印迹(Western blot, WB)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种试验方法,是将蛋白质通过SDS-PAGE电泳后,再转移到杂交膜上,然后通过抗原抗体复合物对特定蛋白质进行特异性检测的方法。1 检测原理    待测蛋白根据其性质(分子量、分子大小、电荷以及其等电点)采用电泳方法进行分离,通过电流将凝胶中的蛋白质转移到聚偏二氟乙烯膜(PVDF)上,利用一抗与抗原特异性结合的原理,以抗体作为探针钓取目的蛋白。

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 分子提取方法 803天前

    蛋白提取组织样本总蛋白提取(小鼠肝组织)1、颈椎脱臼处死小鼠,75%乙醇擦拭皮肤,剪开腹腔,剪切肝脏组织。2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。3、称取0.6g左右肝组织,在平皿中剪碎组织,并转移到匀浆器。4、预冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。5、取2ml预冷裂解缓冲液,迅速加入匀浆器,冰浴条件下充分研磨。6、组织研磨液转移至1.5ml离心管。7、4℃,15000rpm,离心10min。8、取上清组织蛋白粗提取液至新的1.5ml离心管。9、进行蛋白定量,-80℃保存。 

  • 晴天mmm
    晴天mmm  发布了新帖 细胞划痕(迁移)实验 807天前

    实验步骤:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约 每隔1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  2、在空中加入约5×105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。4、用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。  5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0,6,12,24小时取出,拍照 (具体时间依实验需要而定)。6、统计方法:使用Image J软件打开图片后,随机划取6至8条水平线,计算细胞间距离的均值。7、数据处理:每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离,求出均数和标准差,时间为横轴,迁移距离为纵轴(mm

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