绿色荧光是GFP-tag 膜蛋白红色的是染得蛋白

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请问你解决了吗？最近我也做棕榈酸刺激实验，看sigma说明书是用氯仿配置，但看到园内还有发表论文都用BSA配制，不晓得为什么

方便留下您的联系方式吗，N1也可以

楼主还有吗？我有293T细胞，可以交换吗？

就是所有的免疫荧光抗体浓度都一样吗？谢谢

我没有用，直接是离心，可以hanks液洗之后用滤器再过滤一遍

有没有后续呢，楼主现在做出来了吗？我现在也要做，想请教你经验，脱水的时候需要固定吗，具体的步骤怎么做呢

我提取胰岛细胞是简化了的过程，且小鼠胆管太细，穿刺不好进针，所以我们直接取得完整胰腺1.小鼠颈部离断，腹部正中“Y"字切口2.镊子逐层将肠子翻至左边，注意不要污染，直到看到最里面的大肠，组织剪钝性分开结肠与胰腺连接，然后找到十二指肠，顺着十二指肠向下提，钝性分开肠子与胰腺连接，大多轻轻提拉就可以分开，直到小肠与大肠连接处，后找到胃部，分开胃与胰腺连接，最后找到脾脏，提着脾脏将完整胰腺提出，这时候胰腺还与周围肠子有连接，用剪子分开就可以3.有组织剪剪碎胰腺，尽量剪得组织块小些4.将组织块放入离心管中（含有胶原酶P5ml,浓度我是1mg/ml),浓度得自己摸索5.放置37度水浴箱10-15min,得根据你剪得组织块大小，在这个过程中每隔2-3min震荡一次，还要看你的力度，直到成乳糜状

我没有培养过胰岛细胞呢，因为我们这边实验室的二氧化碳培养箱坏了，所以没有培养过呢

谢谢哈，我已经尝试了胶原酶P0.6, 0.8，1.0, 2.0的，水浴16分钟，显微镜下看到的胰岛都像是消化过了样子，郁闷呢

这要看你的竞争对手有几个，你的大主任招几个才能比较出