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  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 H9c2细胞空泡 196天前
    我买的icell 碳酸氢钠1.5g/L的培养基,配合培养箱5%的二氧化碳。我觉得酸碱值可能关系不大,另外胰酶用0.25%含edta的消化1-2分钟,肉眼可见细胞脱落,离心去除胰酶,2-3天传代一次,我的长得很快,1:4-1:5传代太挤不行,避免过度吹打。血清用的普通的
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 H9c2细胞空泡 228天前
    楼主 你现在养的怎么样了?请问正常的h9c2是触角很长、扁扁的长梭形吗?核周有黑色小点吗?
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 H9c2细胞空泡 228天前
    我有两个同事养的也不好,有一个别的医院的师妹养的起也是这样。形态都和你的差不多
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 H9c2细胞空泡 231天前
    我的细胞和你长得一样。也想不通为什么会这样,老师您要是养好了麻烦告诉我一声吧。或者我们一起研讨一下吧。我用gibco dmem高糖+10% gibco fbs(hepes维持ph),约70%时传代,0.125%胰酶edta消化1-2分钟,变圆后立刻终止消化,我用培养皿样的。难道要用不含edta的胰酶?
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  发布了新帖 我的临床血标本收集以及全血rna提取小总结 388天前

    看了好多帖子也查了一些东西,简单整理了一下。因为时间精力有限,不是每管血样都能及时提取rna,所以有一些公司设计了非冷冻全血rna保存液,我查到的比较靠谱的貌似只有qiagen的paxgene?其实是配套了BD特殊采血管(含专利保护rna的成分),可以保存很长时间(网上可以查到介绍),然后搭配qiagen的kit,价格昂贵,望而却步。还有的一家国产公司,貌似叫rnafix? 效果有待考证,没敢尝试。天*恩*泽有一款rnalocker保存全血效果不好,得把白细胞分离出来以后加入,然后还要离心去除,后续搭配trizol/该公司类似trizol的试剂盒。另外全血可能不适合直接加入rnalater或者trizol保存。新鲜全血用trizol也能提出来,但得率和纯度低于白细胞用trizol我

  • 宁静的跳跳糖
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 imagej使用达人指南,分享给大家! 656天前
    看不到啊 大妹子
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  的帖子被加了1分 982天前

    回复:从试剂公司购买的细胞是永生化的,请问永生化细胞与原来的细胞有什么区别吗?

    永生化应该就是指让原代细胞获得永久传代或者增殖的能力吧,初始的原代细胞是无法增殖或者无法无限增殖的,公司的方法现在多是采用转基因的方法,比如SV一些启动子或者端粒相关基因,然后经过不断地培养传代,筛选出能增值的细胞,传统的癌细胞永生话的办法是不断地裸鼠接种获得恶性增殖潜能,但公司...
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 关于母鼠黑暗饲养会不会吃掉小鼠 985天前
    没啥影响吧,我们那里老鼠饲养都是全黑或者开微弱的黄光,老鼠比较喜欢这种环境,如果很亮的灯光照射,母乳会比较活跃警惕,可能不会喂奶,到处拱来拱去,我也是开着灯做新生鼠的实验,没发现它们有什么异常,放回黑暗中也好好的呀
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 从试剂公司购买的细胞是永生化的,请问永生化细胞与原来的细胞有什么区别吗? 985天前
    永生化应该就是指让原代细胞获得永久传代或者增殖的能力吧,初始的原代细胞是无法增殖或者无法无限增殖的,公司的方法现在多是采用转基因的方法,比如SV一些启动子或者端粒相关基因,然后经过不断地培养传代,筛选出能增值的细胞,传统的癌细胞永生话的办法是不断地裸鼠接种获得恶性增殖潜能,但公司做的不多,因为需要spf饲养环境,而且非常慢。
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 关于母鼠黑暗饲养会不会吃掉小鼠 985天前
    p13是什么小鼠,视力缺陷?我只养过C57,买来孕鼠或者自己繁殖,屋子没人进去的话全天关灯,繁殖了几十笼,没遇见过吃新生鼠的情况,只遇到过母性不好或者未及时分离雄鼠,造成不喂奶后饿死新生鼠后被母鼠吃掉的情况。我得白内障的小鼠也没出现这种情况
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 测量ATP 1070天前
    打错了,是ATP不降解
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 测量ATP 1070天前
    不好意思 刚看见 我当时是查到了一篇文献,文献最终的结论是沸水效果较好,好久不做实验了,那篇文献也找不到了,没有你可以自己查一下,我用的是细胞,直接在细胞表面加上沸水,ATP降解,至于组织匀浆能都用沸水匀浆,这个我也不确定,要不你再查一下文献?
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 如何区分选用细胞株还是自己原代培养???? 1188天前
    实验动物经过实验设计处理,然后选取需要研究的组织,可以从该组织中提取原代细胞进行培养,从细胞水平上再次进行研究,比单纯的组织研究可能更方便、结果更多样。而且这种处理过的细胞是没有商品化的细胞株的。但自己提的原代细胞一般不能无限增殖,除非经过特殊处理,比如肿瘤细胞裸鼠接种,所以得现用现提。细胞株一般是具有无限增殖潜能的正常组织或者肿瘤组织,你可以根据实验需要买来,进行处理后实验。
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 western图片在处理的时候能不能调整长宽比? 1188天前
    我感觉应该不能调,条带的宽度会发生变化,分辨率也会发生变化
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 为什么用拼接软件lasergene打不开测序序列拼接呢? 1275天前
    我也遇到了这样的问题,仔细研究后解决了,添加序列的时候,只选择trace类型的文件,就可以了
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 CAG Promoter 1286天前
    好的 谢谢 版主 我也找到了 十分感谢
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 CAG Promoter 1286天前
    好的 谢谢 我找到了
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 CAG Promoter 1290天前
    您好,请问您有CAG的序列吗?
  • 宁静的跳跳糖
    宁静的跳跳糖  回复了帖子 CAG Promoter 1290天前
    您好,请问您有CAG的序列吗?

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