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  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 酵母双杂交筛鸡pbmc受体 186天前

    用的是分裂泛素系统,筛膜蛋白的,目前做到酵母诱饵验证阶段,总共四个诱饵,功能性验证成功----与空文库质粒共转分别涂缺2、缺4,缺二板子长菌;及与阳性对照质粒共转缺2缺4都长菌。分别提蛋白做wb,两个成功,两个还没成功,不知道是什么原因,上届师姐说功能验证成功就可以,就继续往下做了,尝试着用一个诱饵筛库,到今天第四天只长了两个菌,转化效率足够的,菌太少感觉有些不正常,准备再重复一次实验。

  • 大树P91L
    大树P91L  回复了帖子 his抑制剂3-at的使用 201天前
    嗯嗯,就是跟抗生素一样的加
  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 his抑制剂3-at的使用 208天前

    酵母双杂交用,买的是粉末状的,是直接加进培养基去高压,还是压好培养基后倒板子之前加?

  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 求,PDHB1,pPR3-N质粒 216天前

    酵母双杂交用,可以交换可以有偿,实验不易,有质粒的前辈请帮帮忙

  • 大树P91L
    大树P91L  回复了帖子 【原创】实验日志:酵母双杂交 220天前
    前辈,你好,我现在做酵母诱饵的验证卡在转化这一步,卡了好久好久了,找了各种原因,感受态做好我涂了ypda板子发现长了很多,转化步骤按照takara转化试剂盒说明书步骤做的,质粒浓度也很高可是就是没结果,心急不知道高怎么办😱
  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 求助,酵母转化问题 221天前

    用的是NMY51酵母菌,'LIAC法转化,做了几个月,一直不成功,找了各种原因还是不长菌,看到有说电转化效率比较高,有没有前辈能帮我分析指点一下

  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 酵母双杂交细菌污染? 348天前

    最近用构建好的诱饵质粒做功能检测,新手第一次做,连做三次,第一次全都不长,二三次全部的板上都是一片密密麻麻的小白菌,如图(缺④的板子本来不应该长的)

  • 大树P91L
    大树P91L  回复了帖子 cona刺激细胞时间 361天前
    好的,谢谢啦
  • 大树P91L
    大树P91L  回复了帖子 cona刺激细胞时间 374天前
    细胞活化的好是如何判断的呢
  • 大树P91L
    大树P91L  回复了帖子 cona刺激细胞时间 374天前
    是鸡外周血淋巴细胞,是不是我的细胞密度太大
  • 大树P91L
    大树P91L  发布了新帖 cona刺激细胞时间 376天前

    要用cona刺激细胞,然后建cdna文库,看文献上说刺激48小时比较好,发现24小时时细胞状态不错,到43小时细胞状态明显不好,有一些死细胞了。cona浓度10,细胞5×10的6次方,中间没有换过液,求大神帮我分析下原因

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