大家好,我现在在做小鼠气道平滑肌细胞原代培养,因为没有师姐带,自己的操作都不知道对不对,已经分了两次,但都是以污染告终,细胞养不好,实验也没办法做,恳请前辈们的指导!谢谢,关于取材方面和剥离组织方面,我该注意些什么,感觉自己什么都做不好,真的挺闹心的,恳请前辈给出具体的指导!我是用贴壁法培养的,昨天下午刚分的细胞,但是今天早上来时看就已经变黄了,而且可以看到移动的不明生物 然后就扔掉一盘,另外一盘还没有出现类似情况,但我觉得也不能幸免。我的操作是:先处死小鼠,再在75%酒精中泡大概5分钟,然后取气道,可能手法不熟练,在预冷无菌PBS中快速漂洗两三遍,洗去血液,再转入超净台中操作。再漂洗几遍后,进行剥离外层结缔组织,(因为做的是6-8周小鼠,感觉好小只,气道好小,所以可能有损伤气道嫌疑),然后