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  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 有没有可以检测PCR引物的软件 10天前
    软件名字啊
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 转基因小鼠的繁育 10天前
    你说的,一个鼠待产应该没问题
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 基因工程 10天前
    foxo1 f/f指的是这个基因两侧加了loxp位点,用于后续与cre鼠杂交,就是文中说的pgr cre鼠,杂交之后得到foxo1 d/d的鼠,这种鼠的特点是所有表达pgr的细胞的poxo1都被敲除,就是传说中的条件性敲除鼠,具体原理你去搜 条件性敲除鼠或者loxp/cre系统应该都能搜的到。
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 基因工程 10天前
    f/f应该是指flox/flox,条件性敲除。d/d可能是deletion?没有上下文不好判断啊
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 转基因小鼠的繁育 10天前
    另外,如果一直不怀孕的话,可以考虑,不同笼子交换雄鼠
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 转基因小鼠的繁育 10天前
    如果第一次吃仔的话,后面都够呛,保证充足的营养,加瓜子就很好,另外还有一个比较好的办法,发现有多只母鼠同时怀孕的话,可以将孕鼠单独拿出来放在一起待产,小鼠出生7天以内不要动它,就算某一母鼠不带仔,另外一只会帮忙带,存活率会高很多重点就是营养,以及出生一周之类不能动,包括噪声换垫料等都不行
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 有没有可以检测PCR引物的软件 10天前
    primer primier?
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 在设计引物时需不需要每个上游引物都加上ATG? 10天前
    需要带ATG,一般情况下,如果质粒标签在多克隆位点之后是需要自己带ATG的,如果标签在多克隆位点之前就不需要,但是这样的话就需要考虑对框的问题。后面的问题是我觉得不会,密码子是相对于读码框来说的,在酶切位点之前有TAA,这个根本不叫密码子啊,只能叫做序列,因为起始密码子之后的序列才存在框和密码子的问题。
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 关于mirna上机前的浓度稀释问题 10天前
    这个意思就是说你不同组之间cDNA加的量不一样理论上是不影响最后的结果的,不知道我说明白了没有
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 关于mirna上机前的浓度稀释问题 10天前
    不知道你是不是用的deltaCt的方法做的qrt-pcr,这种方法的话,不论是测mRNA还是测miRNA,逆转录之后的cDNA去做qrt-pcr的时候,都是会测内参的,你给的cDNA的多或者是少,影响的是最后的Ct值,cDNA多,Ct会小,对应的内参的Ct值也会小,比如你测基因A,测出来ct值是20,内参ct值是16,基因A的相对表达水平就是0.5的4次方,如果你多加一点cDNA,理论上来说,A和内参的ct值会同时变小,他们的差值是不变的,最后基因A的相对表达水平仍然是0.5的4次方。
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 关于mirna上机前的浓度稀释问题 12天前
    真的语文不好,不明白你到底在说啥,这中间应该涉及到逆转录和qPCR两个过程,以及rna和cDNA,但是不知道描述的到底是哪一个过程
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 HIF-1a基因诱导表达构建 12天前
    HIF1A的蛋白水平主要受到泛素化降解的调控,缺氧之后,降解减少所以蛋白水平增加,其实不管是否缺氧,HIF1A都是有表达的,只是常氧条件下,HIF1A半衰期短,表达出来很快降解了,所以检测不到,所以你测mRNA没有结果是很正常的,HIF1A的调控机制已经很清楚了,楼上说的很对,你要做蛋白水平。
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 免疫学实验:PMB分离 12天前
    如果对细胞纯度要求不高的话,可以用贴壁的方法,单核细胞粘附能力强,淋巴细胞弱
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 为什么选c啊 12天前
    因为这里问的是肿瘤筛查,除了AFP和PSA比较特异之外,其他的肿瘤标志物并不特异,高不一定是肿瘤而且很多肿瘤CEA都会升高,一般都是用于监测复发或者评价治疗效果,但是AFP和PSA高的话,是很明确的指向性肝癌和前列腺癌的。
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 骨髓巨噬细胞原代培养方法简述 12天前
    不是圆的,有触角的
  • 午后的红太狼
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 每月细胞版风云战友奖励专用帖 21天前
    得票第10,谢谢版主
  • null
     关注了 
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 知道BSP引物序列,如何查询扩增出来的片段长度? 41天前
    你用的是人的还是鼠的基因组?我可以帮你试一下
  • 午后的红太狼
    午后的红太狼  回复了帖子 质粒抽提时选真核抗性还是原核抗性 41天前
    将质粒导入大肠杆菌中扩增质粒的过程,用原核抗性amp,包括转化用的细菌培养板,摇菌用的液体LB培养基都需要加氨苄抗生素将质粒导入哺乳动物细胞,比如转染或者病毒感染之后的筛选过程的话,用真核抗性筛选,加G418

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