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  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 髓鞘染色protocol 14天前
    你好,请问您第8步的放置在常温是直接晾着切片吗?片子会干吧?还是放在水中?我做的脊髓石蜡切片,LFB是一片蓝色,灰白质分界并不清楚。多谢!
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 IBA1免疫荧光染色 33天前
    你俩操作方法可能差不多。样本和抗体质量是很关键的因素。拿你的抗体和你同学的抗体同时染你俩的样本 看看结果怎么样 可能的话,让你同学也这么做一次
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 求助文献电子版,谢谢! 34天前
    注意查收
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 IBA1免疫荧光染色 34天前
    这家公司的Iba1很好呀 我们实验室都是1:500使用的,没问题。首先要确定买的是染荧光的抗体吗?他们家IF和WB的是分开卖的应该。另外,我们固定破膜是冰丙酮-20固定破膜10-20min,你可以试试。最后补充一点,你的二抗平时也是1:500使用的吧?应该是没问题的吧?
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 琼脂糖凝胶电泳条带异常,有没有人遇到过? 34天前
    神奇了 重点考虑凝胶不好 怎么配的胶?等待多久使用?
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 求助,脂肪组织提RNA和pro的问题 39天前
    你在丁香园提问的功夫就可以做一遍得出结论了 先研磨了提个RNA看看 时间也快 蛋白质麻烦点 可以在盐酸胍那一步放着
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 求助,脂肪组织提RNA和pro的问题 39天前
    没这样做过 如果样本珍贵的话,你可以试试,还是有希望的;如果不是特别珍贵的话,建议你重新取材再做一遍。如果取材后不能立即提取,可以直接放在液氮里冻存,或如你所说,液氮研磨加Trizol后冻存。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 有谁染过冰冻切片CD86和CD206的免疫荧光 41天前
    不是点状的 你可以找文献再看看
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 journal of cancer 编辑给回信了,这几个问题不知如何回复,求助 42天前
    刚才回复的因为网络都没了,哭晕。3.审稿人让你拿手术切除的组织样本作参照,评估细胞系的实验结果和组织的相关性。最好补实验,不行的话找找相关文献,如果别人有类似的做法,就引用文献回复即可。4.审稿人质疑为什么细胞实验的药物浓度就一个。要么你找个可靠的文献,说人家就这么做的,这个浓度是有依据的;要么你就做不同药物浓度梯度的实验,证实你采用的这个是最好的。当然这个浓度梯度应该是你之前就摸索过的,把数据列出来就行。5.你文章格式有问题。仔细按杂志要求改改,然后找个有经验的人把把关。大修。好好改,机会很大。祝顺利。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 Endnote已经和WPS链接起来了,别人修改的稿件传给我后,如何和我之前的该稿件Endnote数据库链接起来进行文献的修改呀?谢谢。 46天前
    我是endnote X7和microsoft word关联在一起的,别人的插好的文献,用我的电脑打开就可以编辑参考文献。情况有二。一是两个版本的内容没有重复,这样直接把两篇文章复制粘贴在一起,参考文献就自动改变了。二是,两个版本的内容相似只是参考文献有变化,那就再比着插一遍。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 western显影后背景灰蒙蒙的,如何避免 46天前
    按楼主所说,考虑样本蛋白制备或抗体有问题。鉴于内参也不行,首先考虑是样本蛋白制备的问题。建议你找一个别人跑到好的样品一起做做试试。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 WB测蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰水平 47天前
    我就是用的这个货号的抗体,1:2000,没问题。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 这种图是怎么做的啊,求助 55天前
    mark 关注
  • 医生hrr
  • 医生hrr
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 求助:如何用graphpad prism 做下面的图 58天前
    那是怎么做呢?我在设置里找了半天没有找到 请赐教~谢谢!
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 小鼠脚掌皮下注射怎么打?感觉好难。求指教!!! 58天前
    我做过大鼠的。先麻醉,然后在足跟部向足尖方向进针,进去一些距离后注射(防止注射物从针眼溢出),按压进针处片刻,抽针,完毕。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 求助:如何用graphpad prism 做下面的图 58天前
    我猜测那两个水平的虚线和对应的纵坐标的数值是作者后期加上去的,不是软件自动生成的。图片本身应该是个单纯的折线图。
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 关于审稿人的问题 58天前
    是否是关于正态分布和方差齐性检验的假设?类似这种“A Shapiro-Wilk test for normality was performed to determine suitable tests for parametric or non-parametric populations. F-tests were performed to determine equal variance of populations, otherwise tests assuming unequal variance were performed.”
  • 医生hrr
    医生hrr  回复了帖子 审稿人的问题。 58天前
    关于PK实验的解释:丙酮酸激酶(PK)是催化糖酵解途径中最后一步的酶,能催化将磷酸基团从磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)转移到ADP,生成一分子丙酮酸盐和一分子ATP。由于丙酮酸激酶表达或活性的缺陷会造成的丙酮酸激酶缺乏症,是溶血性贫血的第二大常见原因。丙酮酸酶活性检测试剂盒提供了一种简单且直接的检测多种生物样品中丙酮酸激酶活性的方法。丙酮酸的浓度可通过偶联酶促反应来测定,此反应会生成与样品中的丙酮酸含量成正比的比色(570 nm)/ 荧光(λex = 535/λem = 587 nm)产物。一单位丙酮酸激酶的定义为,在25℃ 条件下每分钟将一个磷酸基团从PEP转移到ADP生成1μmol 丙酮酸所需的酶量。from Sigma审稿人认为你现在提供的结果不足以证明A的活性,应该做PK实验来直接证实。

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