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【建议】在美国行医

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【交流】女性受到“歧视”

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【请教】路遇病人

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  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 急!!!子宫内膜细胞只能通过原代培养吗 1天前
    看你目标了,子宫内膜细胞分上皮细胞和间质细胞,如果你研究的是间质细胞的话,可能实验进度会快点。有间质细胞的永生化细胞系,提间质细胞原代也相对好提。。要是研究上皮细胞的话,呵呵,困难重重,但是可以突破。。需要资金和时间、精力,比间质细胞累。。还有就看你发文章的高度,如果就是水水的发篇低分文章的话,国内的细胞系还是可以使用的。。要是发高分文章,国内的细胞系也许是真的,但是不被国际认可。。白做。。。做原代会被国际认可,但是你做病毒转染啥的,也可以试着转染,但是难度系数肯定是比细胞系高的。。。做好心理准备就自己是慢慢试验吧
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 急!!!子宫内膜细胞只能通过原代培养吗 1天前
    看你目标了,子宫内膜细胞分上皮细胞和间质细胞,如果你研究的是间质细胞的话,可能实验进度会快点。有间质细胞的永生化细胞系,提间质细胞原代也相对好提。。要是研究上皮细胞的话,呵呵,困难重重,但是可以突破。。需要资金和时间、精力,比间质细胞累。。还有就看你发文章的高度,如果就是水水的发篇低分文章的话,国内的细胞系还是可以使用的。。要是发高分文章,国内的细胞系也许是真的,但是不被国际认可。。白做。。。做原代会被国际认可,但是你做病毒转染啥的,也可以试着转染,但是难度系数肯定是比细胞系高的。。。做好心理准备就自己是慢慢试验吧
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 Q-PCR 溶解曲线分析 1天前
    你跑的PCR仪器上自动出来的。。跑PCR不仅仅出CT值,同时也出相应的图像,如扩增曲线。溶解曲线等。意思就是那个仪器是图像结果和数字结果是同时有的。。第二、用的是96孔板,跑的基因不同啊,组别不同等等,你自己好好研究下你们的实时PCR仪器对应的软件,图像的话可以选择出现一个孔的图像,选择多个孔,也可以出现多个孔的图像,很智能。
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 【求助】realtime PCR反应完的产物能去跑胶吗? 1天前
    第一点感觉有时候有必要,比如并不是每一个引物的溶解曲线设计的都是完美的单峰。。有时候会出现双峰,但是有一个峰不明显,也不知道是二聚体还是引物不特异?还是其他问题,这个引物,条件到底能不能用,尤其是对于溶解曲线不是很好的情况时,可以跑胶看一下。但是胶也不是万能的,也许是2种产物,但是产物分子量区别不大,胶分离不开这2种产物,造成假阴性结果。。只能说这个方法可以做预实验时看下。。第二点我觉得没有必要,跑胶测灰度,推测模板量。。这意思就是用PCR的最终产物推测模板量,最终产物推测模板本身就不太准确
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  的帖子被加了1分 2天前

    回复:细胞貌似是污染了什么东西,求辨认求解救

    我也出现过,感觉外形像支原体或者黑胶虫,但是黑胶虫在显微镜下可以观察到在移动。。这个来区别。。至于是不是衣原体,不是特别敢确定。。有次我也是这样子,考虑到测支原体费用高,就用罗红霉素了,第2天观察,干净的很,但是不能听罗红霉素,一停的话会马上疯长起来。。 所以是可以被罗红霉素抑制...
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 细胞貌似是污染了什么东西,求辨认求解救 2天前
    我也出现过,感觉外形像支原体或者黑胶虫,但是黑胶虫在显微镜下可以观察到在移动。。这个来区别。。至于是不是衣原体,不是特别敢确定。。有次我也是这样子,考虑到测支原体费用高,就用罗红霉素了,第2天观察,干净的很,但是不能听罗红霉素,一停的话会马上疯长起来。。 所以是可以被罗红霉素抑制的菌,可能是支原体,也可能是其他菌。
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 跑完实时荧光定量PCR,再跑的电泳,发现胶比较脆,而且条带不清。是新手!求助!!! 2天前
    marker都没跑好,应该些解决这个问题,胶的问题,电泳液的问题,还有marker本身的问题,上样量的问题。。你现在是marker和待测样本跑的结果都差,所以只能一个一个去排除。等marker跑好了,待测样仍然是这个样子的时候再考虑样本方面的问题
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 求购子宫内膜上皮细胞系 7天前
    想办法把原代养起来吧。。原代的代表意义更加接近真实,如果原代养的好,而且满足做实验的条件就比细胞系好多了。。当然,目前的问题是原代不好养
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 各位KO小鼠的引物是怎么来的。 8天前
    弄懂了,一般来说一个基因要2个引物..有3个引物的原因是其中有一条引物是公用的。。所以要扩增2种基因,4条引物,若其中一个公用,则为3条引物
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  发布了新帖 养子宫内膜原代细胞养的绝望 8天前

    刚开始师姐教养原代细胞,跟着师姐的步伐走,感觉还比较顺利,但半个月后左右,提取的细胞开始连续出现污染,问题在哪? 把所有原代要用的试剂分别取2ml置于6孔板中于培养箱中培养,24h/48h观察,均未见液体变浑浊。那现在的问题就是第一、取材;第二、自己的操作。。取材,其他师兄师姐都是那么取材的,别人都没事,到我这就有事了,感觉像是自己操作的问题更大,心塞。。师姐说最容易出现污染的操作是:倒液体的时候接触瓶口的液体回流可能会增加污染;还有就是换液时枪头来回吸取,释放液体。。这两个部分最容易出现污染。。本来取标本就折腾很久,取了以后还污染,一天就这样白搭了。。。都折腾了一个月了,还没养好

  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 子宫内膜异位原代培养腺体细胞养不出来 8天前
    请教下:您后期培养上皮细胞是不加血清用的吗?我现在养上皮细胞,有2个问题:第一、纯度不够,所以在想怎把间质细胞再消灭掉。。先用的100目、400目滤网过滤的,但是过滤只过滤了大部分间质细胞,仍有少量的间质细胞混杂在上皮细胞中,在培养的过程中,用的20%血清/F12培养,因间质细胞生长太快,上皮细胞生长慢,所以即使少量的间质细胞存在,后期也疯狂增殖,挤压上皮细胞。我想先解决这个问题。  准备加表皮细胞生长因子。目前在纠结是DMEM/F12中仅添加生长因子培养 还是还得把血清加上。。准备做预实验,如果大神做过这方面实验,给否指教下,好少走些弯路
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 规培医院要求我们明年4月前必须上交一篇一作论文,这合理吗?! 9天前
    毛病吧。。规培就是因为现在出现的一种情况:硕士读研期间都去搞科研了,临床看病能力啥也不会,各医院医疗水平参差不齐。。所以才想把医疗技术标准化。。。这下好了,又要临床科研两头抓,结果就是一头也做不好。。
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 求助:有养过人原代肺上皮细胞的吗?急求方法! 11天前
    楼主,可否说下后期哪些地方进行了改进,成功的。。求经验,谢谢
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 为什么基础培养基和添加物在原代细胞培养中如此重要? 11天前
    我查了下没有子宫内膜上皮细胞的专用培养基啊
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 被小老板强抢了申博和毕业唯一一篇文章的一作,想要自杀 13天前
    主要矛盾在她老公毕不不了业,所以用你的。。有没有哪种办法,你和她老公共同一作这种,让你俩都毕业的方法? 毕竟这年头得罪小老板有时候也是吃不了兜着走
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 生长因子对细胞的影响 13天前
    贵公司培养原代子宫内膜上皮细胞吗?可否指教下
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 求购子宫内膜上皮细胞系 13天前
    谈一下我最近搜索子宫内膜上皮细胞的感想1.查找细胞系:在Cell等文献上看到有人使用来自ATCC的永生化异位内膜上皮细胞系,经查ATCC,该细胞系已没有了。在国内查,发现永生化异位内膜上皮细胞系,出自武大细胞库,与他们核实过,为上皮细胞。但是后续联系STR鉴定的公司后明白:人源细胞系STR鉴定:鉴定的不是这个细胞是不是人子宫内膜上皮细胞,而是具有个体独特性的。什么意思呢?这就像DNA指纹,每个细胞都是独一无二的。假如分别从2个患者中分别获取相同的组织提取细胞,后续的建系等方法均一致,但这两种细胞如果行STR鉴定,其STR是不吻合的。换句话说,细胞STR鉴定就是以ATCC为标准,凡是和ATCC细胞出自同一个母代的,这个细胞的STR鉴定你就是真的,否则就是假的(尽管特性什么均一致,但是没上传自A
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 求购子宫内膜上皮细胞系 14天前
    我是着急的要死
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 请问哪位大侠知道现在有商品化的正常子宫内膜细胞株和子宫内膜异位细胞株? 15天前
    我最近也在找子宫内膜上皮细胞系, 人正常子宫内膜上皮细胞系没有,但有报道人异位子宫内膜上皮细胞系,国内的是HEM15A,但这个细胞系德玛名字和国外文献报道的不一致。  但想着是上皮细胞系就不错了。。。结果继续搜索 有报道是上皮细胞,有报道是间质细胞。。现在有点犹豫不知道该不该入手,已联系到卖15A的商家说有这个细胞系,我现在就怕买到的是间质细胞,哎,再继续与商家继续沟通下决定。
  • 出走的淡水鱼
    出走的淡水鱼  回复了帖子 学医一路走来都是泪水洒过的路。 15天前
    哎,你这是在公共实验室吧,,这就是与别忍拥有自己实验室的差别。没办法,实验条件所限

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