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丁香客

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  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 东北这个破地方,荒凉得不适合生存 994天前

    从南方来到北方,感觉这边大半年都是冬天,大半年都刮风,满街满地都是灰尘,不带个口罩都没法出门,一到晚上街上人烟稀少,饭店关门早,早上路上也是人都没几个,夜生活完全没法跟广州、上海比!请问东北城市是患上瘟疫了吗?工资还低,经济增长还倒数第一,这辈子谁呆在东北就是浪费生命。

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  加入了调查派 1005天前
  • 你的套路你做主
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 做小鼠乳腺癌组织单细胞悬液用酶消化法好还是匀浆器好? 1013天前

    各位莅临此贴的朋友你们好,我在做babl/c小鼠 4T1乳腺癌肿瘤模型的药物治疗筛查,目前对肿瘤组织制作成单细胞悬液有一些疑问,试过玻璃匀浆器研磨组织,不过镜下发现细胞碎片较多,细胞死亡比例也高(大概20-30%),最后磁珠分选得到的T细胞亚型很少。1不知道用胶原酶是不是更好,还需要透明质酸酶和DNA酶1吗,?(我的小鼠肿瘤组织比较硬,不像肝脏、胰岛、脾脏那样脆)2 我的下游实验是用单细胞悬液做流式测Treg细胞和免疫磁珠分选treg细胞,如果用酶消化,会不会影响细胞表面的抗原分子,导致流式染不上色和磁珠抓不到细胞谢谢指导!3 如果用酶消化更好的话,用几型胶原酶,四型还是二型?还需要别的酶搭配吗,比如胰蛋白酶搭配一起用?

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 小鼠肿瘤组织单细胞悬液制备。研磨法还是酶消化法更好? 1013天前

    各位莅临此贴的朋友你们好,我在做babl/c小鼠 4T1乳腺癌肿瘤模型的药物治疗筛查,目前对肿瘤组织制作成单细胞悬液有一些疑问,试过玻璃匀浆器研磨组织,不过镜下发现细胞碎片较多,细胞死亡比例也高(大概20-30%),最后磁珠分选得到的T细胞亚型很少。1不知道用胶原酶是不是更好,还需要透明质酸酶和DNA酶1吗,?(我的小鼠肿瘤组织比较硬,不像肝脏、胰岛、脾脏那样脆)2 我的下游实验是用单细胞悬液做流式测Treg细胞和免疫磁珠分选treg细胞,如果用酶消化,会不会影响细胞表面的抗原分子,导致流式染不上色和磁珠抓不到细胞谢谢指导!3 如果用酶消化更好的话,用几型胶原酶,四型还是二型?还需要别的酶搭配吗,比如胰蛋白酶搭配一起用?

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 小鼠肿瘤组织单细胞悬液制备。研磨法还是酶消化法更好? 1013天前

    各位莅临此贴的朋友你们好,我在做babl/c小鼠 4T1乳腺癌肿瘤模型的药物治疗筛查,目前对肿瘤组织制作成单细胞悬液有一些疑问,试过玻璃匀浆器研磨组织,不过镜下发现细胞碎片较多,细胞死亡比例也高(大概20-30%),最后磁珠分选得到的T细胞亚型很少。1不知道用胶原酶是不是更好,还需要透明质酸酶和DNA酶1吗,?(我的小鼠肿瘤组织比较硬,不像肝脏、胰岛、脾脏那样脆)2 我的下游实验是用单细胞悬液做流式测Treg细胞和免疫磁珠分选treg细胞,如果用酶消化,会不会影响细胞表面的抗原分子,导致流式染不上色和磁珠抓不到细胞谢谢指导!3 如果用酶消化更好的话,用几型胶原酶,四型还是二型?还需要别的酶搭配吗,比如胰蛋白酶搭配一起用?

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 奥德赛荧光WB二抗荧光染料大比拼! 1017天前

    谢谢各位光临本帖,小弟想请教一下LI-Cor的奥德赛机器做双通道(680、800)荧光WB选择哪个荧光二抗更胜一筹?自己查了些资料自己认为从荧光强度和灵敏度来看可能是如下顺序,请教各位做荧光WB的高手解答,万分感谢!祝各位生活愉快。1:800通道 dylight800>alexa fluor790>IRDye800?2 680通道alexa fluor 680>dylight680>IRDye680?

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 荧光WB!delight系列、Alexa fluor系列、IRDye系列大比拼! 1017天前

    谢谢各位光临本帖,小弟想请教一下LI-Cor的奥德赛机器做双通道(680、800)荧光WB选择哪个荧光二抗更胜一筹?自己查了些资料自己认为从荧光强度和灵敏度来看可能是如下顺序,请教各位做荧光WB的高手解答,万分感谢!祝各位生活愉快。1:800绿光通道 dylight800>alexa fluor790>IRDye800?2 680红光通道alexa fluor 680>dylight680>IRDye680?

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 想读学说的进,过来人分享点经验 1018天前
    我也是二战,学硕研二期间考的执业医师,建议条件允许再战,同时从现在开始准备执业医师。
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 你们男生都喜欢什么样的女生啊?都说说看 1018天前
    戴眼镜看不见栩栩如生、有神的双眼皮了
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 厉害了我的WB!就要这么玩 1018天前

    请问,我只有一份样本,需要检测8个指标,分别买了8个abcam的鼠单克隆抗体,宿主全是鼠源的,分子量分别是130Kda、110kda、100kda、85kda、65kda、50kda、46kda、37kda,二抗只选择一种兔抗鼠,HRP标记,将这8种抗体同时加入一抗稀释液中同时进行4度过夜孵育,最后一起孵育二抗,最后ECL发光看结果,大家觉得我这个想法怎么样?就像CST公司的Multiplex Western Cocktail 一样,一次WB,终身受益,呵呵......  只不过我没有对着8个抗体进行混合验证有无非特异性结合而已!附上一张CST官网的图片,4个一抗混合物全来自兔,而且同时孵育,谁说一抗必须不同种属?!!!

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 碉堡!WB一个样本同时检测8个蛋白! 1018天前

    请问,我只有一份样本,需要检测8个指标,分别买了8个abcam的鼠单克隆抗体,宿主全是鼠源的,分子量分别是130Kda、110kda、100kda、85kda、65kda、50kda、46kda、37kda,二抗只选择一种兔抗鼠,HRP标记,将这8种抗体同时加入一抗稀释液中同时进行4度过夜孵育,最后一起孵育二抗,最后ECL发光看结果,大家觉得我这个想法怎么样?就像CST公司的Multiplex Western Cocktail 一样,一次WB,终身受益,呵呵......  只不过我没有对着8个抗体进行混合验证有无非特异性结合而已!附上一张CST官网的图片,4个一抗混合物全来自兔,而且同时孵育,谁说一抗必须不同种属?!!!

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 小鼠Treg细胞分离及后续WB、qRT-PCR 1020天前
    那个lumenex可不可以定制细胞内蛋白,按道理说这个世界上有成品的抗体卖就可以和luminex的微球偶联结合吧?不管细胞内蛋白还是胞外细胞因子都应该可以定制出来吧?我也看了下,感觉样本很珍贵的情况下用它那个很适合,听说50微升细胞裂解液可以同时测定500种蛋白?灵敏度还比elisa还高
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 调剂求助:298分,英语73,西综167,政治58 1025天前
    病原微生物应该可以
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 调剂求助:298分,英语73,西综167,政治58 1025天前
    基本过线就能走
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  回复了帖子 调剂求助:298分,英语73,西综167,政治58 1025天前
    把你电话私信给我
  • 你的套路你做主
  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 abcam、novus、invitrogen、CST、R&D、BD、sigma哪家好? 1026天前

    首先谢谢各位莅临此帖的人,本人学术性小硕一枚,刚开始做实验,最近开始买抗体做组化实验,老板和师兄都强调要进口一线抗体,不差钱!好几个指标从citeab搜索出来都有,比如abcam、novus、invitrogen、CST、R&D、BD、bio-rad、sigma-aldrich,二抗打算买Jackson的,但一抗到底哪个公司好些?citeab这个网站搜出太多抗体了,感觉有一百多个抗体公司,还都是进口的一样,我很想知道,如果非要排名的话1 哪些抗体公司算是进口一线?R$D能够得着边吗2 哪些抗体公司是进口二线?abcam 挤得进去吗3 哪些抗体公司是进口三线?CST算吗麻烦各位懂的人给予建议,为我以后买抗体的挑选上有数,谢谢。

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 abcam、novus、invitrogen、CST、R&D、BD、sigma哪个公司好些? 1026天前

    首先谢谢各位莅临此帖的人,本人最近买抗体做组化实验,好几个指标从citeab搜索出来都有,比如abcam、novus、invitrogen、CST、R&D、BD、bio-rad、sigma-aldrich,二抗打算买Jackson的,但一抗到底哪个公司好些?citeab这个网站搜出太多抗体了,感觉有一百多个抗体公司,还都是进口的一样,我很想知道,如果非要排名的话1 哪些抗体公司算是进口一线?R$D能够得着边吗2 哪些抗体公司是进口二线?abcam 挤得进去吗3 哪些抗体公司是进口三线?CST算吗麻烦各位懂的人给予建议,为我以后买抗体的挑选上有数,谢谢。

  • 你的套路你做主
    你的套路你做主  发布了新帖 想读学说的进,过来人分享点经验 1026天前

    我认为读学术型前提是1 你要能接受比专硕晚三年工作,你毕业三年后拿到规培证又有文章的情况下和你同期毕业的专硕比,如果你是老板你愿意招谁?(比如你家庭条件挺好,不着急工作赚钱还想在学校找个女朋友谈个恋爱什么的建议学硕)2 老板不一定要有课题,但老板的实验室要有钱,或者老板有权,并且手底下目前没有太多学生,你去了你如果愿意研究他就会给你平台,我很庆幸的是我老板从来不跟我计较实验室花钱的事情,我才一学期学花了老板近10万块钱老板也不说什么,并且我还想多根老板混一年,读个研究生让老板掏个2二三十万老板让你学实验技术和科研思维,何乐而不为?你做失败了钱不是你自己出,我就听了我一老师说,他研究生期间花了老板30多万,博士期间花了老板70多万,也就是说,老板给你投入多少钱决定你学硕的好坏。3 本

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