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【原创】3T3-L1的分化问题

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【讨论】胰腺组织石蜡切片免疫荧光

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【求助】小鼠棕色脂肪与白色脂肪的位置

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  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 P2A猪捷申病毒2A剪切肽 204天前
    请问,2A其实原本的长度是您优化过的吗?因为一篇plos one的文章用的四种2A的长度均比您的长5~6个AA,这是您优化过的?对剪切无影响?
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 关于3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞的一点心得和体会!! 674天前
    你这张图片跟我的染色结果很像。。。。
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 AIA和CIA造模原理 700天前
    CIA的尾部造模:国内写尾部皮下注射,我看的SCI是尾静脉注射,请问鼠尾皮下能注射液体吗?还是意思就是尾静脉
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 小鼠类风湿性关节炎 701天前
    您没有权限阅读该帖子
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 Mac版的Prism GraphPad 7.0a 701天前
    文件名改成zip
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 EndNote X8某大学图书馆版,Win和Mac都有,还有EndNote X7正版KEY! 701天前
    ryoxmac已顺利安装 首先,在链接上直接右键,选择下载链接文件,否则直接点开是乱码 下载下来,可能会自己给dmg文件后面加txt后缀,重命名删掉.txt即可 安装是双击dmg文件后,弹出来的东西双击安装,一路下一步完事。多谢指导!我的mac也安装好了,跟window用起来没区别,非常好!
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 科伦研发弯道超车,5年要成为中国创新药第一 725天前
    拿了offer,生物+药理,希望能在科伦做出一番成绩!
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 DSS诱导小鼠溃结结肠组织提纯PCR技巧 830天前
    RNA-Seq会将组间差异基因倍数大的用热图显示出,肌层和浆膜层组织按道理应该受到的影响很小,最后作图时不知道能否去除这部分没有变化的肌层和浆膜层组织基因
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 DSS诱导小鼠溃结结肠组织提纯PCR技巧 847天前
    我也遇到你这种情况,但是只有在用DSS造模急性肠炎才会这样,如果是慢性肠炎,重复DSS刺激的方法,后期换成正常饮水7天时机体也足够代谢掉这些DSSps:我用kit提取RNA也能快速去除组织的DSS我是新手,请问做肠道组织的RNA必须刮取结肠粘膜提总PCR???我直接连着肠衣截成一个个圆柱体进行提取的会不会导致背景噪音太大?即使这样我想要的Q-PCR数据也能得到了,但是不知道能不能送样做RNA-Seq
  • 伤心定义
    伤心定义  发布了新帖 小鼠鼠尾基因型鉴定总结 867天前

    小鼠尾巴消化(小鼠DNA提取-快速法):方法不稳定,尽量少用,当PCR引物为2~3条时可以使用 1)   每管中加入100μl NaOH溶液 (A液:25mM NaOH+2mM EDTA);煮沸至100oC,持续1h,然后置冰上; 2)   每管加入100μl Tris溶液 (B液:40 mMTris-HCl, pH 8.0),涡旋混匀;3)   按各个基因型具体PCR反应条件进行PCR反应: DNA模板 1-2μl 上、下游引物各加 1μl 2x PCR Mix 10μl ddH2O 5-7μl Total 20 ul

  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 做cas9基因敲除,最后测序敲除的碱基数如果是3的倍数是不是就不对 1048天前
    你有出现过敲除蛋白又恢复的情况吗?cas9刚筛到一株单克隆,检测目的蛋白敲除了,但是过了一段时间后发现目的蛋白又能检测出来了。不存在细胞污染和支原体情况
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 如何从JOVE下载视频 1197天前
    这个方法照旧能用!!!!万分感谢楼主!!!
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 Cas9基因敲除技术详述 1217天前
    请问cas9和gRNA的质粒直接顺转进去?这个效率跟稳转慢病毒比差不多吗?一般慢病毒表达质粒都是PLV,我现在用的是13年science中George M. Church的双质粒(CAS9与gRNA),这两个质粒的载体能联合gag, pol, and rev进行慢病毒吗
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 需要快速老化痴呆小白鼠(SAM)的站友注意了! 1231天前
    请问现在这个联系方式还有效吗?
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 小鼠基因型鉴定请教 1236天前
    如果你想鉴定一直老鼠里是否同时有这两个基因,那么你就得加这两个基因的正,反向引物,两个基因一起扩增。如果老鼠体内都有这两个基因,那么在胶上显示两个不同条带,分别是这两个基因。您好,我在jackson官网查了类似的小鼠鉴定基因的protocol(点突变knock in小鼠)。Notes:    This assay will NOT distinguish hemizygous from homozygous transgenic animals.    Expected Results:    Transgene= ~600 bpInternal positive control = 324 bp这个意思是普通PCR不能鉴定出KO与
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 小鼠基因型鉴定请教 1236天前
    我现在也碰到跟你一模一样的事情;两种不同的knock in小鼠,引物要2对,并且其中有一对是一样的,另外一对不一样。并且PCR鉴定基因型一直没有鉴定出双条带的杂合,一直都是显示单条带的WT,每次用公司寄来的小鼠做阳性对照(双条带)。按照孟德斯鸠概率,我用杂合和WT繁殖应该有1/2的概率得到杂合啊!50只鉴定出来全是WT,不知道什么问题
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 GEO数据库里的Value 和 Rank 1248天前
    请问下对应秩,这个秩是什么意思?
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 GEO profile数据如何分析,有图!! 1248天前
    能否解释下:秩~蓝点表示该基因在样本全部基因中的秩
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 求助:谁知道有一种叫Bbs1的限制性内切酶的? 1297天前
    Bbs1请问哪里有卖?网站?
  • 伤心定义
    伤心定义  回复了帖子 3T3-L1的分化问题 1299天前
    最开始为铺明胶带,但是后期就没铺了,换液轻柔就行,就像293T一样液体冲击大了也就飘了细胞15代足够分化的

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